ヒガシナメクジウオ卵における受精前後の細胞内骨格と母性mRNAの動態

披针茅卵受精前后细胞内骨架和母体mRNA的动态变化

基本信息

批准号：
07F07704
负责人：
和田洋
金额：
$ 1.41万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07F07704/
关键词：
ナメクジウオホヤ Hox1 転写制御レチノイン酸 Hox シスエレメント

项目摘要

ナメクジウオと同様にHox1遺伝子の発現がレチノイン酸による発現の制御を受けていることが明らかになっているホヤでHox1遺伝子の発現制御を解析した。ホヤにおいては、すでにHox1のシス制御領域を明らかにしており、レチノイン酸に応答する領域と同時に、表皮での特異的な発現を制御している領域も明らかにしていた。そこで、ホヤのそのシス領域に結合する転写因子の同定を行った。まず、ゲルシフトアッセイの結果、レチノイン酸応答配列にRAR/RXRのヘテロダイマーが結合することを確認することができた。その一方で、このホヤのレチノイン酸応答配列は、ニワトリに導入した際には機能しないことが明らかになった。ナメクジウオのHoxの転写制御に関わるレチノイン酸応答配列は、ニワトリに導入した際に神経管において、前後軸方向に制御された発現が活性化されることが明らかになっている。したがって、同じトランスの転写因子が関与しているにもかかわらず、一方はニワトリで機能できるが、一方では機能できないという結果が得られたことになる。このことは、トランス因子とシスエレメントの共進化が起こっているのか、あるいは、ホヤと脊椎動物では高次の機能に関しての違いが見られるかの可能性が考えられる。シスエレメントの進化を考えていく上での興味深い結果が得られた。また、レチノイン酸と協調して、表皮での発現を制御するトランスの因子として、Grainyhead遺伝子を候補考えて、研究を進めてきた。この遺伝子が、予想通り表皮で発現することを確認することができたが、機能解析に関しては十分な結論を得ることができなかった。今後の課題である。

我们分析了海鞘中 Hox1 基因表达的调控，已证明海鞘受到视黄酸的调控，与文昌鱼类似。在海鞘中，我们已经鉴定出Hox1的顺式调控区域，包括响应视黄酸的区域和控制其在表皮中特异性表达的区域。因此，我们在海鞘中鉴定出了与该顺式区域结合的转录因子。首先，作为凝胶位移测定的结果，我们能够确认 RAR/RXR 异二聚体与视黄酸反应元件结合。另一方面，研究表明，这种海鞘视黄酸反应元件在引入鸡体内后不起作用。研究表明，当将参与文昌鱼Hox转录控制的视黄酸反应元件引入鸡体内时，其在神经管中的前后方向表达被激活。因此，即使涉及相同的反转录因子，其中一种可以在鸡中发挥作用，而另一种则不能。这表明反式和顺式元件的共同进化可能正在发生，或者海鞘和脊椎动物在高阶功能上存在差异。当考虑顺式元素的演化时，我们获得了有趣的结果。我们还一直在研究 Grainyhead 基因作为反式因子的候选者，该反式因子与视黄酸合作控制其在表皮中的表达。尽管我们能够确认该基因如预期在表皮中表达，但我们无法就其功能分析得出充分的结论。这是一个未来的问题。