全リポ蛋白粒子の粒子径と疎水性に関するデータベースの作製

创建所有脂蛋白颗粒的粒径和疏水性数据库

• 批准号: 23590657
• 负责人: 千葉 仁志
• 金额: $ 3.33万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23590657/
• 关键词: リポタンパク質; 粒子径; 原子間力顕微鏡

原子間力顕微鏡（AFM)はナノスケールの大きさや形状の計測を行う能力を持ち、さらにカンチレバーに修飾を行うことにより様々な機能的計測を可能にすることから、生体物質の医学的応用が期待される。本課題ではAFMをリポタンパク質粒子の計測と分類に応用することにを目標にしている。リポタンパク質は代謝過程のなかで粒子径を変化させるが、小型LDLと動脈硬化との関連がこれまでに知られている。また、HDL粒子径とHDLの高動脈硬化的性質との関連も知られつつある。本課題はここまでの研究期間内に、AFMによるLDLと小型LDLの粒子径計測の妥当性について、電子顕微鏡（EM)と比較することにより評価してきた。AFMはタンピングモードで行い、EMはネガティブ染色モードで行った。6名の健常者から超遠心法により分離した大型LDLと小型LDLを比較した。AFMとEMのそれぞれにおいて両リポタンパク質分画の粒子径は有意性をもって大型リポタンパク質が大きかった。AFMとEMの間での比較においては、いずれのリポタンパク質分画においても、二つの方法間で有意差をもって測定値に違いがあった。次いで、総リポタンパク質分画を指標としてAFMとEMによる計測を行った。HDLとLDLの粒子数の分布は、AFMでは、それぞれ64.3と24.1％で、EMではそれぞれ72.5％と14.1％であった。方法間の不一致の原因として、小型LDLとHDLの間の分解能力がAFMではEMよりも低いことが考えられた。その原因としてカンチレバーの径が市販の最小径のものでも小型LDLやHDLの測定には大きすぎることが考えられた。小径のカンチレバーの開発の必要性が明らかとなった。

原子力显微镜（AFM）具有测量纳米级尺寸和形状的能力，通过修改悬臂梁，可以实现各种功能测量，因此有望在生物材料方面实现医学应用。该项目的目标是将 AFM 应用于脂蛋白颗粒的测量和分类。脂蛋白在代谢过程中会改变颗粒大小，众所周知，小 LDL 与动脉硬化有关。此外，人们逐渐知道 HDL 颗粒大小与 HDL 的高动脉硬化特性之间存在关系。在迄今为止的研究期间，该项目通过与电子显微镜（EM）进行比较，评估了 AFM 测量 LDL 和小 LDL 粒径的有效性。 AFM 在捣固模式下进行，EM 在负染色模式下进行。对通过超速离心从六名健康受试者中分离出的大 LDL 和小 LDL 进行了比较。在 AFM 和 EM 中，大脂蛋白的两种脂蛋白级分的粒径分别明显更大。在AFM和EM的比较中，对于所有脂蛋白组分，两种方法的测量值存在显着差异。接下来，以总脂蛋白分数为指标，使用AFM和EM进行测定。 HDL 和 LDL 的颗粒数分布在 AFM 中分别为 64.3% 和 24.1%，在 EM 中分别为 72.5% 和 14.1%。两种方法之间存在差异的一个可能原因是 AFM 中小 LDL 和 HDL 的降解能力低于 EM 中的降解能力。其原因被认为是悬臂的直径，即使是最小的市售悬臂，也太大而无法测量小的 LDL 和 HDL。开发小直径悬臂的需求变得显而易见。

项目成果

Xanthohumol prevents atherosclerosis by reducing arterial cholesterol content via CETP and apolipoprotein E in CETP-transgenic mice.

• DOI: 10.1371/journal.pone.0049415
• 发表时间: 2012
• 期刊: PloS one
• 影响因子: 3.7
• 作者: Hirata H;Yimin;Segawa S;Ozaki M;Kobayashi N;Shigyo T;Chiba H
• 通讯作者: Chiba H

Stable isotope-dilution liquid chromatography/tandem mass spectrometry method for determination of thyroxine in saliva

稳定同位素稀释液相色谱/串联质谱法测定唾液中甲状腺素

• DOI: 10.1016/j.jchromb.2011.02.048
• 发表时间: 2011
• 期刊: J.Chromatogr.B
• 作者: Higashi T.;et al
• 通讯作者: et al

原子間力顕微鏡によるリポタンパク質の粒径分布の解析

使用原子力显微镜分析脂蛋白的粒径分布

• 发表时间: 2012
• 作者: Mori T;Kanbara T;Harumiya M;Iwase Y;Masumoto A;Komiya S;Nakamura A;Shibasaki M;Kanemasa T;Sakaguchi G;Suzuki T.;櫻井 俊宏， 高橋 順也， 武田 晴治， Trirongjitmoah Suchin， 浪田 健， 神 繁樹， 清水 孝一， 千葉 仁志．
• 通讯作者: 櫻井 俊宏， 高橋 順也， 武田 晴治， Trirongjitmoah Suchin， 浪田 健， 神 繁樹， 清水 孝一， 千葉 仁志．

Novel monoclonal antibody recognizing triglyceride-rich oxidized LDLs associated with severe liver disease and small oxidized LDLs in normal subjects

新型单克隆抗体可识别与严重肝病相关的富含甘油三酯的氧化低密度脂蛋白和正常受试者中的小氧化低密度脂蛋白

• DOI: 10.1258/acb.2012.011284
• 发表时间: 2012
• 期刊: Ann Clin Biochem
• 影响因子: 2.2
• 作者: Fujioka M.;Muroi C.;Mishima K.;Fujiwara M.;Okuchi K.;Siesjo B.K;Sakurai T
• 通讯作者: Sakurai T

脂質酸化の新しい評価系の開発

脂质氧化新评价体系的开发

• 发表时间: 2012
• 作者: 千葉仁志