培養肺胞上皮細胞気管内投与による肺病変修復促進

培养肺泡上皮细胞气管内给药促进肺部病变修复

基本信息

批准号：
21659368
负责人：
須加原一博
金额：
$ 1.98万
依托单位：
University of the Ryukyus
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1. 培養肺胞II型上皮細胞気管内投与による投与(培養)細胞の動態-これまでの研究成果から、KGF投与後2～3日目に最大増殖能(BrdU取り込み最大)を示し、イオン輸送能もそれとよく相関することなどが明らかになった。2.骨髄幹細胞からのlung stem cellsの分離と病変修復への応用-GFPラットに5-FUを投与し、骨髄を刺激し、骨髄細胞を採取。培養し血球成分を除いた骨髄幹細胞を静脈投与し、肺胞への生着度を検索。ブレオマイシン肺傷害への生着度を比較検討し、傷害肺への生着が高いことがわかった。さらに、SP-A抗体による染色を行うと、血管から肺組織へ遊走した骨髄細胞の中に、SP-A抗体に染色される細胞があった。肺胞II型上皮細胞に特異的なSP-C mRNAをin situ hybridization法で検索すると、肺胞内のグリーンの上皮細胞に発現しており、肺胞II型上皮への分化と考えられた。現在これらがKGFに反応するか検索中。反応する場合は、病変修復作用があるか検索を計画している。特に、培養細胞を気管内投与し、骨髄細胞を血管内投与することで、修復促進できるものと期待される。3.Ethylpyruvateによる肺傷害抑制機序の解明-培養肺細胞(A549細胞)を用いて、ethyl pyruvate(EP)のNF-kBに対する抑制効果を検索した。A549細胞をTNF-αで刺激するとNF-kBが活性化(7.5倍増加)されるが、この作用がethyl pyruvateで濃度依存性に抑制された。EPはIkBaの蛋白量増加を抑制した。この遺伝子発現も抑制した。EPはNF-kBシグナル経路の活性化が重要な役割りをもつ炎症を抑制することが期待された。

1。通过气管内给药肺泡II型上皮细胞的施用（培养）细胞的动力学 - 先前的研究结果表明，在kGF给药后的2至3天显示了最大的增殖能力（最大BRDU摄取），并且该离子运输能力也与此密切相关。 2。应用于从骨髓干细胞和病变修复中分离肺干细胞-GFP大鼠施用5 -FU，刺激骨髓并收集骨髓细胞。将骨髓干细胞从血细胞成分中培养并去除，以静脉注射以寻找植入肺泡。比较了博来霉素对肺损伤的植入程度，发现它是受伤的肺部的高植入。此外，在用SP-A抗体染色时，骨髓细胞中有SP-A抗体染色的细胞，这些细胞从血管迁移到肺组织。当使用原位杂交方法搜索针对II型肺泡II型上皮细胞的SP-C mRNA时，它在肺泡内的绿色上皮细胞中表达，并被认为分化为II型肺泡II型上皮。目前正在搜索以查看这些是否响应KGF。如果响应，则计划搜索病变维修。特别是，可以预期可以通过静脉内给予培养的细胞并通过血管内施用骨髓细胞来促进修复。 3。阐明乙基丙酮酸抑制肺损伤的机制 - 我们使用培养的肺细胞（A549细胞）搜索了乙基丙酮酸（EP）对NF -KB的抑制作用。用TNF-α刺激A549细胞会激活NF-KB（增加7.5倍），但这种作用以丙酮酸乙基的浓度依赖性抑制。 EP抑制了IKBA蛋白质含量的增加。该基因表达也被抑制。 EP有望抑制炎症，其中NF-KB信号通路的激活起着重要作用。