新規抗ヘルペス薬開発による難治性ウイルス性疾患・腫瘍の治療戦略

开发新型抗疱疹药物治疗难治性病毒性疾病和肿瘤的策略

基本信息

批准号：
21659237
负责人：
松岡雅雄
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、未だに特異的治療法が確立していないEBウイルス感染症および関連腫瘍に対する、新規治療薬の開発ならびに作用機序の解析を行った。ヒト骨肉腫由来細胞である143BにEBウイルスのthymidine kinase (TK)を発現させたスクリーニング系を用いて同定された核酸誘導体は、EBウイルス潜伏感染状態にあるB細胞や、EBウイルス非感染T細胞には全く増殖阻害活性を示さなかった。一方、慢性活動性EBウイルス感染症患者由来のリンパ球系細胞であるKAI3に対しては、4.3μMのIC50を示した。一方、対照として用いたガンシクロビルは、EBV非感染T細胞にも増殖抑制効果を示した。我々が同定した核酸誘導体は、EBウイルスのTKが発現している細胞においてのみその増殖阻害活性が見られたことから、本化合物の、TKを介した優れたEBウイルス選択的作用が明らかとなった。また、健常人のPBMCを用いたEBウイルス感染実験からは、化合物非存在下でEBウイルスを感染させた細胞におけるウイルス量を100%とした場合、化合物存在下ではウイルス量は10%以下にまで低下していた。さらに、作用機序の解析においては、TKに対するshRNAを組込んだレンチウイルスを感染させたKAI3細胞では、TKの発現低下に伴って薬剤感受性の減少が認められた。以上の結果から、本核酸誘導体は、実際にTKを標的分子としていることが明らかとなった。これらの結果は、EBウイルス関連腫瘍に対する特異的治療薬の開発が可能であることを示しており、我々が同定した核酸誘導体がその候補薬として適していると考えられた。

在这项研究中，我们开发了一种新的治疗药物，并分析了其对尚未建立特异性治疗方法的 EBV 感染和相关肿瘤的作用机制。使用在人骨肉瘤来源的143B细胞中表达EB病毒胸苷激酶(TK)的筛选系统鉴定出的核酸衍生物用于靶向潜伏感染EB病毒的B细胞和未感染EB病毒的T细胞，没有显示出生长抑制活性。。另一方面，它对 KAI3 的 IC50 为 4.3 μM，KAI3 是一种来自慢性活动性 EBV 感染患者的淋巴细胞。另一方面，用作对照的更昔洛韦也显示出对非EBV感染的T细胞的增殖抑制作用。我们鉴定的核酸衍生物仅在表达EB病毒TK的细胞中表现出生长抑制活性，证明了该化合物对EB病毒具有优异的TK介导的选择性作用。此外，从使用健康个体的PBMC进行的EB病毒感染实验中发现，当在不存在该化合物的情况下感染EB病毒的细胞中的病毒量为100%时，病毒量减少至小于10% 在该化合物的存在下它正在下降。此外，在作用机制的分析中，在感染了含有针对TK的shRNA的慢病毒的KAI3细胞中，随着TK表达的减少，观察到药物敏感性降低。从以上结果可知，该核酸衍生物实际上以TK为靶标。这些结果表明开发针对EBV相关肿瘤的特异性治疗药物是可能的，并且我们鉴定的核酸衍生物被认为适合作为候选药物。