ヘルペスウイルスを標的とした新規治療薬開発による難治性腫瘍克服

通过开发针对疱疹病毒的新治疗药物来克服顽固性肿瘤

• 批准号: 15659228
• 负责人: 松岡 雅雄
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659228/
• 关键词: ヘルペスウイルス; リン酸化; 抗ウイルス剤; DNAメチル化

内在性thymidine kinase(TK)欠損細胞株であるヒト骨肉腫細胞株143BにEBV-TK,KSHV-TK、ヒトTK遺伝子を発現させ、この細胞株に様々な核酸化合物を添加しMTTアッセイで細胞傷害作用を確認することによりTKでリン酸化される化合物をスクリーニングした。核酸系化合物をスクリーニングすることによりEBV-TK,KSHV-TK特異的に阻害効果を有する化合物を同定した.EBV-TK発現細胞株に対するEC50は0.049μg/mlであり、KSHV-TK発現細胞株に対するEC50は0.64μg/mlであった。EBV感染細胞株RPMI8866を用いてDNAメチル化阻害剤である5-aza-deoxy-cytidine (5-azaCdR)、Histone deacethylase阻害剤であるTrichostatin A(TSA)、butylateで処理することによって化合物に対する感受性の亢進を認めた。またEBV初感染により引き起こされるChronic EBV infectionに対する治療効果を確認するために末梢血リンパ球にB958より分離したEBVを感染させる系に薬剤を加え、その抑制効果を解析した。本化合物を加えることによりMTTアッセイで細胞数の減少を認め、primary infectionに対しても有効である可能性が示唆された。

EBV-TK、KSHV-TK和人TK基因在人骨肉瘤细胞系143B中表达，该细胞系是内源性胸苷激酶（TK）缺陷的细胞系，并向该细胞系中添加各种核酸化合物以检测细胞毒性通过MTT测定，我们通过确认其作用来筛选被TK磷酸化的化合物。通过筛选核酸化合物，我们鉴定出对EBV-TK和KSHV-TK具有特异性抑制作用的化合物。对EBV-TK表达细胞系的EC50为0.049μg/ml，EC50为0.64μg/ml。用 5-氮杂脱氧胞苷 (5-azaCdR)（一种 DNA 甲基化抑制剂）、曲古抑菌素 A (TSA)（一种组蛋白脱乙酰酶抑制剂）和丁酸盐处理 EBV 感染的细胞系 RPMI8866，观察到对化合物的敏感性增加。 。此外，为了确认对原发性EBV感染引起的慢性EBV感染的治疗效果，我们在外周血淋巴细胞感染了从B958分离的EBV的系统中添加了药物，并分析了其抑制效果。通过添加这种化合物，MTT 测定中观察到细胞数量减少，表明它也可能有效对抗原发感染。

项目成果

Tobinai K: "Cladribine/ATL Study Group, Japan. Phase II study of cladribine (2-chlorodeoxyadenosine) in relapsed or refractory adult T-cell leukemia-lymphoma."Int J Hematol.. 77. 512-517 (2003)

Tobinai K：“克拉屈滨/ATL 研究小组，日本。克拉屈滨（2-氯脱氧腺苷）治疗复发或难治性成人 T 细胞白血病-淋巴瘤的 II 期研究。”Int J Hematol.. 77. 512-517 (2003)

Studies of nonnucleoside HIV-1 reverse transcriptase inhibitors. Part 1 : Design and synthesis of thiazolidenebezenesulfonamides.

非核苷 HIV-1 逆转录酶抑制剂的研究。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Bioorg Med Chem 12
• 作者: Takeda S.;Kohgo S.;Masuda N.
• 通讯作者: Masuda N.