細菌型mitoNEET新規構造に立脚したレドックスシステム生理学的解析

基于细菌mitoNEET新结构的氧化还原系统生理分析

• 批准号: 21659111
• 负责人: 岩崎 俊雄
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Nippon Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659111/
• 关键词: mitoNEET; 鉄硫黄クラスター; 金属蛋白質; 好熱菌; レドックス; 構造機能生理; 国際情報交流; アメリカ; アメリカ:ドイツ

細菌型mitoNEETは[2Fe-2S]クラスターをもつ可溶性蛋白質であり、電子伝達、あるいは生体内レドックス・バランスと対応した新しい生体内システムと推察される。高度好熱菌Thermus thermophilusゲノム解析で見出した細菌型mitoNEETホモログ(TthNEET0026)につき、構造機能生理解析を連携して行い、平成22年度には以下の主要成果を得た。1.T.thermophilus HB8のTthNEET0026欠損株を作成し、生育阻害が認められたため、好熱菌主要代謝系につき網羅的メタボローム解析を行い、野生株と比較機能解析した。本研究成果は、昨年度の構造解析結果と合わせ、今後論文として発表する。2.Hisタグ付加したTthNEET0026の相同組換株を作成したが、欠損株と同様に生育阻害された。このため、酵素の両末端ではなく、内部配列にタグを組み込んだ変異株作成と表現型解析をすすめる予定である。3.TthNEET0026の[2Fe-2S]クラスターの配位残基His52→Cys変異を導入することで、鉄硫黄クラスターの性質を変化させた変異酵素を作成、昨年度に続き詳細な分光解析を行った。今後、論文として発表する。3.好熱菌よりも遺伝子操作しやすいシアノバクテリアのゲノム情報ベースに基づき、細菌型mitoNEETホモログを検討し、リコンビナント蛋白質を作成、新規mitoNEETホモログであることを世界ではじめて同定した。シアノバクテリアホモログは凝集しやすく、好熱菌ホモログよりも扱いにくいが、その相手蛋白質候補を見出したため、共発現・欠損株作成等を今後行い、新たな展開をはかる筋道をつけることができた。

细菌Mitoneet是一种具有[2FE-2S]簇的可溶性蛋白，估计是一种与电子传输或体内氧化还原平衡相对应的新型体内系统。在高度嗜热细菌的基因组分析中发现的细菌Mitoneet同源物（TTHNEET0026）是与结构和功能生理学分析合作进行的，在2010年获得以下主要结果，并在2010年获得了以下主要结果。嗜热的主要代谢系统和与野生菌株的比较功能分析。这项研究发现将在未来与去年结构分析的结果一起发表。 2。准备了带有标签的Tthneet0026的同源重组，但以与缺失菌株相同的方式发育迟缓。因此，我们计划促进突变菌株的产生和表型分析，其中标签被纳入内部序列而不是在酶的两端中。 3。通过引入[2FE-2S] tthneet0026的[2FE-2S]群集的HIS52→CYS突变，我们创建了一种突变酶，以改变铁硫簇的性质，然后在去年，我们进行了详细的光谱分析。它将在未来作为论文发表。 3。基于蓝细菌的基因组信息基础，该信息基础比嗜热细菌更具遗传性工程，我们研究了细菌Mitoneet同源物，创建了一种重组蛋白，并在世界上首次将其鉴定为新型的MitoneNONE同源物。蓝细菌同源物易于聚集，并且比嗜热同源物更难使用，但是由于他们找到了伴侣蛋白质的候选者，因此他们能够通过在未来共表达和创造有缺陷的菌株来开发一种新方法。

项目成果

長いHisタグ伸長鎖をつけて結晶化した超好熱菌古細菌Rieskeフェレドキシンの構造・変異酵素解析(4P-0323)

带有长组氨酸标签的延伸链结晶的超嗜热古菌 Rieske 铁氧还蛋白 (4P-0323) 的结构和突变酶分析

• 发表时间: 2010
• 作者: 鴻巣麻子;他
• 通讯作者: 他

補欠分子族と生命初期進化:有機物と無機物のインターフェース(ワークショップ・セッション2W21-8)

假体基团和生命的早期进化：有机物和无机物的界面（研讨会会议 2W21-8）

• 发表时间: 2010
• 作者: 鴻巣麻子;他;岩崎俊雄
• 通讯作者: 岩崎俊雄

Thermophile "NEET" : structure toward functional understanding.

嗜热物质“NEET”：朝向功能理解的结构。

• 发表时间: 2009
• 期刊: J.Biol.Inorg.Chem. 14 Suppl 1
• 作者: Toshio Iwasaki;他
• 通讯作者: 他

Toward heterologous overexpression of hyperthermophilic archaeal iron-sulfur metalloenzyme complexes in Escherichia coli : a case study with the archaeal recombinant SdhC subunit.

大肠杆菌中超嗜热古菌铁硫金属酶复合物的异源过度表达：古菌重组 SdhC 亚基的案例研究。

• 发表时间: 2009
• 作者: 鴻巣麻子;他
• 通讯作者: 他

Iron-sulfur world in aerobic and hyperthermoacidophilic archaea Sulfolobus (Review)

需氧和超嗜酸古菌硫化叶菌中的铁硫世界（综述）

• 发表时间: 2010
• 期刊: Archaea
• 影响因子: 2.4
• 作者: Okamoto T.;et al;Toshio Iwasaki
• 通讯作者: Toshio Iwasaki