Dvlを介した微小管ダイナミクスによる細胞基質間接着制御の分子機構

Dvl介导的微管动力学控制细胞-基质粘附的分子机制

• 批准号: 21659079
• 负责人: 菊池 章
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659079/
• 关键词: Dvl; シグナル伝達; 微小管; 細胞基質間接着; 細胞極性

細胞胞基質間接着は細胞の運動や極性決定のための重要な細胞機能である。これまで細胞基質接着斑形成にはアクチン骨格の重要性が明らかになっている。微小管も接着斑形成に関与しているが、その分子機構は不明である。私共は、微小管の安定性に関与するとされているDvlの機能を解析している際に、偶然にDvlが接着斑の重要な蛋白質であるFocal adhesion kinase(FAK)と複合体を形成することを見出した。本研究課題においては、微小管による接着斑形成制御をDvlに焦点あてて解析を行い、下記の成果を得た。1 Dvlは運動時の細胞端や接着開始時の細胞皮質側に存在した。それらの領域には微小管(+)端が集中し、(+)端に存在するAPCとDvlが結合した。この結合には、DvlのC末端側とAPCのアルマジロリピートが重要であった。また、Dvlをノックダウンすると、微小管(+)端のダイナミクスが抑制された。2 APCが接着斑蛋白質であるパキシリンと結合した。さらに、少なくともDvl/APC/FAK並びにDvl/APC/FAKの三量体が存在した。Wound healingアッセイにおいて、細胞先導端にDvlがAPCを介してパキシリンをリクルートした。3 DvlまたはAPCをノックダウンすると、細胞接着能とFAKの活性化、パキシリンのリン酸化が抑制された。4 Wnt5aはAPCとDvlの結合を促進し、細胞辺縁部へのAPCの集積を促進した。Wnt5a依存性のAPCの集積はDvlのノックダウンにより消失した。また、Wnt5a受容体であるFrizzled2はインテグリンと細胞辺縁部で隣接し、クロスリンカーの存在下に複合体を形成した。これらの結果から、細胞辺縁部でDvlとAPCが結合して、微小管を安定化させることが、細胞の接着や運動に重要な働きをすることが明らかになった。また、Wnt5aは細胞接着に関与することが知られていたが、その作用に、Fz2/Dvl/APCを介するシグナル経路がインテグリン/FAK/パキシリンシグナル経路と協調的に働く可能性が示唆された。

Lichlear基质粘附是细胞运动和极性测定的重要细胞功能。到目前为止，肌动蛋白骨骼对形成细胞底物灶的重要性已经阐明。微管也参与了局灶性粘附的形成，但它们的分子机制尚不清楚。我们发现DVL可以与粘着量激酶（FAK）（一种粘附的关键蛋白质）进行复合。在本研究主题中，我们通过关注DVL分析了微管在形成粘附过程中的控制，并实现了以下结果。在运动开始时，在运动过程中和细胞皮质侧存在1个DVL。微管（+）末端集中在这些区域中，并且将存在（+）末端的APC和DVL组合在一起。 DVL的C末端和APC的臂法重复序列对于这种结合很重要。同样，敲击DVL抑制了微管（+）末端的动力学。 2与Paxillin结合的APC，一种局灶性粘附蛋白。此外，至少存在DVL/APC/FAK和DVL/APC/FAK的三聚体。在伤口愈合的测定中，DVL通过细胞引导端通过APC募集了paxillin。 3 DVL或APC的敲低抑制细胞粘附能力，FAK的激活和帕西林磷酸化。 4 Wnt5a促进了APC与DVL的结合，并在细胞边缘促进了APC积累。 Wnt5a依赖性APC的积累由于DVL敲低而丢失。此外，Wnt5a受体Frizzled2与细胞边缘的整合素相邻，并在交联的存在下形成复合物。这些结果表明，DVL和APC在细胞边缘的结合并稳定微管在细胞粘附和运动中起重要作用。此外，尽管已知Wnt5a参与细胞粘附，但建议通过FZ2/DVL/APC的信号途径与整合素/FAK/Paxilin信号途径一起使用。

项目成果

LRP6 is internalized by Dkk1 to suppress its phosphorylation in the lipid raft and is recycled for reuse

• DOI: 10.1242/jcs.058008
• 发表时间: 2010-02-01
• 期刊: JOURNAL OF CELL SCIENCE
• 影响因子: 4
• 作者: Sakane, Hiroshi;Yamamoto, Hideki;Kikuchi, Akira
• 通讯作者: Kikuchi, Akira

CHD8 suppreses p53-mediated apoptosis through histone H1 recruotment during early embryogenesis

CHD8 在早期胚胎发生过程中通过组蛋白 H1 重新招募来抑制 p53 介导的细胞凋亡

• 发表时间: 2009
• 期刊: Nat. Cell Biol
• 作者: Nishiyama;M.;Oshikawa;K.;Tukada;Y.;Nakagawa;T.;Iemura S.;Natsume;T.;Fan Y.;Kikuchi;A.;Skoultchi;A. I.;and Nakayama;K
• 通讯作者: K

Axin localizes to the centrosome and is involved in microtubule nucleation

• DOI: 10.1038/embor.2009.45
• 发表时间: 2009-06-01
• 期刊: EMBO REPORTS
• 影响因子: 7.7
• 作者: Fumoto, Katsumi;Kadono, Moe;Kikuchi, Akira
• 通讯作者: Kikuchi, Akira

Laminin γ2 Mediates Wnt5a-Induced Invasion of Gastric Cancer Cells

• DOI: 10.1053/j.gastro.2009.02.003
• 发表时间: 2009-07-01
• 期刊: GASTROENTEROLOGY
• 影响因子: 29.4
• 作者: Yamamoto, Hideki;Kitadai, Yasuhiko;Kikuchi, Akira
• 通讯作者: Kikuchi, Akira

Wnt5a signaling is involved in the aggressiveness of prostate cancer and expression of metalloproteinase

• DOI: 10.1038/onc.2009.496
• 发表时间: 2010-04-08
• 期刊: ONCOGENE
• 影响因子: 8
• 作者: Yamamoto, H.;Oue, N.;Kikuchi, A.
• 通讯作者: Kikuchi, A.