Identification of novel tissue-specific stem and progenitor cells responding to Wnt signaling

鉴定响应 Wnt 信号传导的新型组织特异性干细胞和祖细胞

基本信息

批准号：
21H04797
负责人：
菊池章
金额：
$ 27.87万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-05 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

令和3年度に作製したAQP3-CreERT(AQP3の開始コドン直下にCre-ERT2を挿入した改変マウス);Rosa-STOP-YFPマウスを用いて、AQP3陽性細胞の系統追跡解析(Lineage tracing analysis)を行った。唾液腺においては、生理的にはYFP陽性細胞の発現を認めなかったが、導管結紮後の傷害唾液腺組織においては導管部にYFP陽性細胞が出現した。その後、結紮解除後3週間の組織修復時においては、唾液腺全体にYFP陽性細胞(AQP3陽性細胞の子孫細胞)が確認された。この結果から、導管結紮後の唾液腺障害からの修復過程にAQP3陽性細胞が関与することが明らかになった。生理的(非傷害時)にAQP3が発現する食道上皮においては、タモキシフェン投与直後にはYFP陽性細胞が基底層近傍に認められ、投与60日後には重層扁平上皮の表層までYFP陽性細胞が拡大した。この結果から、食道上皮においてAQP3陽性細胞が恒常的な重層扁平上皮の維持に関与している可能性が示唆された。一方、AQP3陽性細胞を除去する目的で、AQP3-2A-CreERT2(AQP3の終止コドン直下にT2Aを介してCreERT2を挿入した改変マウス);Rosa-STOP-DTRマウスを新たに作製した。AQP3-2A-CreERT2マウスはCreERT2の発現量がAQP3-CreERT2マウスよりも高く、細胞除去解析に有用である可能性が示唆された。実際、AQP3-2A-CreERT2;Rosa-STOP-DTRマウスの食道からオルガノイドを作製し、DT（ジフテリア毒素）を投与したところ、AQP3陽性細胞が除去されることが確認された。本改変マウスを用いて、生体内でAQP3陽性細胞を除去し、唾液腺の修復や食道上皮の維持に与える影響を検討している。

Lineage tracing analysis of AQP3-positive cells was performed using AQP3-CreERT (modified mice in which Cre-ERT2 was inserted directly under the start codon of AQP3) and Rosa-STOP-YFP mice produced in 2021. Physiologically, no YFP-positive cells were observed in the salivary glands, but YFP-positive cells appeared in the duct in the injured salivary gland连接后的组织。此后，在结扎释放三周后，在组织修复时，在整个唾液腺中证实了YFP阳性细胞（AQP3阳性细胞的后代细胞）。这些结果表明，AQP3阳性细胞参与了导管连接后唾液腺损伤的修复过程。在食管上皮（在生理上表达AQP3）（未受伤时），在他莫昔芬给药后立即在基础层附近观察到YFP阳性细胞，在给药后60天，YFP阳性细胞扩展到分层的鳞状上皮的表面。这些结果表明，AQP3阳性细胞可能参与了组成型分层鳞状上皮的维持。另一方面，为了删除AQP3阳性细胞，AQP3-2A-CREERT2（一种修饰的鼠标，其中Creert2通过T2A直接在AQP3的终止密码子下方插入）； Rosa-Stop-DTR小鼠是新生产的。 AQP3-2A-Creert2小鼠比AQP3-Creert2小鼠表现出更高的CREERT2表达水平，这表明它们可能对细胞去除分析有用。实际上，通过AQP3-2A-CREERT2; ROSA-Stop-DTR小鼠的食道产生类器官，并给予了DT（白喉毒素），并确认除去AQP3阳性细胞。使用这种修饰的小鼠，我们正在研究体内AQP3阳性细胞的影响，并检查对唾液腺修复和食管上皮的影响。

项目成果

期刊论文数量（47）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Wnt5a regulates cellular state of specific subtype of fibroblast and accelerates tumor progression.

Wnt5a 调节成纤维细胞特定亚型的细胞状态并加速肿瘤进展。

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Harada A;Harada T;Yasumizu Y;Kikuchi A.
通讯作者：
Kikuchi A.

Wntシグナル研究を基盤とした新規抗がん剤開発への挑戦

基于Wnt信号研究开发新抗癌药物的挑战

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Hiroko Nishikawa;Priscillia Christiany;Takeru Hayashi;Hisashi Iizasa;Hironori Yoshiyama;Masanori Hatakeyama;井上飛鳥;菊池　章
通讯作者：
菊池　章

GREB1 drives HNF4α-dependent oncogenic transcription and tumor growth in Wnt signal-activated hepatocellular carcinoma.

GREB1 在 Wnt 信号激活的肝细胞癌中驱动 HNF4α 依赖性致癌转录和肿瘤生长。