成体組織幹細胞からホルモン産生細胞への分化トリガーを同定する

确定成体组织干细胞分化为激素产生细胞的触发因素

基本信息

批准号：
22K06798
负责人：
堀口幸太郎
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Kyorin University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06798/
关键词：
下垂体前葉 CD9 組織幹細胞細胞表面抗原ニッチ下垂体腺腫 SOX2 幹細胞

项目摘要

成体の組織幹細胞は、ニッチと呼ばれる周囲環境によって制御されて、組織内の細胞供給源となる。内分泌器官である下垂体前葉には、PrimaryニッチとSecondaryニッチが存在する。申請者らは、ラットを使い、Primaryニッチ内の組織幹細胞が細胞表面抗原CD9を発現し、Secondaryニッチへ移動・増殖し、血管内皮細胞とホルモン産生細胞を供給することをこれまでに報告した。本研究の目的は、プロラクチン（PRL）細胞、成長ホルモン（GH）細胞、甲状腺刺激ホルモン（TSH）細胞それぞれが増加する腫瘍化モデルラットでのPrimaryニッチにおける組織幹細胞の分化開始を組織学的に観察し、さらに申請者が成功したラット下垂体前葉組織幹細胞の純化法を利用して、それぞれのモデルラットにおけるPrimaryニッチのCD9/SOX2陽性細胞を単離し、RNA sepを利用し、分化開始因子、腫瘍化開始因子を同定するという2点である。2022年度は、ジエチルスティルベストロールを投与してPRL細胞腺腫を引き起こしたラットの作成、生理条件でPRL細胞の増加が見られる妊娠ラットの利用、GH産生腺腫を引き起こす成長ホルモン放出ホルモンを腹腔投与したラット、TSH産生腺腫を引き起こすプロピルチオウラシルを飲水投与したラットを作成した。分化開始時のCD9/SOX2、各ホルモンに対する免疫組織化学染色によって陽性となる細胞数を計測した。その結果、Primaryニッチにおいて、PRL細胞増殖時において、組織幹細胞であるCD9/SOX2両陽性細胞の割合が減少していた。これらの結果は学会にて発表し、論文掲載された。さらに、それぞれのモデルラットとコントロールラットのPrimaryニッチの組織幹細胞を申請者が確立した方法で単離し、RNA seq解析を外部に委託注文した。その結果を現在解析中である。

成人组织干细胞由称为利基市场的环境控制，以充当组织内的细胞来源。内分泌器官的垂体前腺具有主要和次要生态位。申请人先前已经报道说，原发性小裂中的组织干细胞表达细胞表面抗原CD9，迁移并增殖到次生小裂中，供应血管内皮细胞和产生激素的细胞。这项研究的目的是从组织学上观察到催乳素（PRL）细胞，生长激素（GH）细胞和甲状腺刺激性激素（TSH）细胞的催乳素（PRL）细胞，生长激素（GH）细胞的开始中的组织干细胞的起始大鼠，并使用RNA sep确定分化起始因子和肿瘤发生因子。 In fiscal 2022, we created rats that caused PRL cell adenomas by administering diethylstillbestolol, used pregnant rats that showed an increase in PRL cells under physiological conditions, rats that received peritoneal administration of growth hormone-releasing hormone, which causes GH-producing adenomas, and rats that received drinking water with propylthiouracil, which causes TSH-producing腺瘤。通过对CD9/SOX2的免疫组织化学染色以及分化开始时的每种激素来测量测试阳性的细胞数量。结果，在初级生态位的PRL细胞增殖过程中，组织干细胞（CD9/SOX2阳性细胞）的比例降低。这些结果在会议上提出并在论文中发表。此外，使用申请人建立的方法分离了来自每个模型大鼠和对照大鼠的主要壁细胞的组织干细胞，并将RNA SEQ分析外包。结果目前正在分析。