カイコがもつ感染抵抗性因子を利用した昆虫ウイルス感染機構の解明

利用家蚕感染抗性因子阐明昆虫病毒感染机制

• 批准号: 10J06163
• 负责人: 伊藤 克彦
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: National Institute of Agrobiological Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10J06163/
• 关键词: カイコ; カイコ濃核病ウイルス; Densovirus; 抵抗性遺伝子; nsd-1; nsd-2

カイコ濃核病ウイルス1型および2型のウイルス感染機構について調査した。ウイルス1型においては、ウイルス接種後のカイコの病徴を経時的に調査した。その結果、カイコは、ウイルス接種後致死するまでに約10日の時間を要すること、さらに致死の直前までは、成長に顕著な差は見られないことがわかった。また、これらの個体において中腸がどのような影響を受けているのかを調べるために、切片を作成し、組織染色により観察を行った。その結果、感染末期に近づくにつれて、核が肥大化した円筒細胞の数が増えていく様子が観察された。同様に、ウイルスの増幅を、リアルタイムPCRを用いて、ウイルス由来の転写産物量を測定することにより調べた。その結果、ウイルスは接種後6日目から急激に増え始め、致死するまで増加していることがわかった。この推移は、中腸切片の観察で明らかになった、核が肥大化した細胞数が増加する時期と同調していた。一方、ウイルス2型においては、ウイルスのレセプターとして機能していると考えられるウイルス抵抗性/感受性遺伝子nsd-2(+^<nsd-2>)の中腸での発現場所とウイルスの感染場所との関係性を調査することで、1ウイルス2型の感染機構の解明に取り組んだ。ウイルス2型の標的組織である中腸を前部、中部、後部に分け、それぞれの領域における抵抗性/感受性遺伝子の発現の有無を調査したところ、本遺伝子は中腸後部で強く発現しており、前部ではわずかに、そして、中部では発現していないことが明らかになった。そこで、ウイルス2型が中腸後部のみで感染しているのかどうかを調査したところ、予想に反して、中腸のすべての領域でウイルスの転写産物が検出された。この結果は、ウイルス2型感染においてレセプターを介さないcell-to-cell感染が起こっている可能性を示唆するもので、濃核病ウイルスの新たなウイルス感染機構の発見に繋がったと言える。

我们研究了家蚕高核病毒1型和2型的病毒感染机制。对于1型病毒，对接种病毒后一段时间的蚕的疾病症状进行了调查。结果显示，蚕在接种病毒后大约需要10天才能致死，并且直到死亡前夕生长没有明显差异。此外，为了研究这些个体的中肠受到的影响，制备切片并使用组织染色进行观察。结果，随着感染接近末期，观察到细胞核增大的圆柱形细胞的数量增加。同样，通过使用实时 PCR 测量病毒衍生转​​录本的数量来研究病毒扩增。结果显示，病毒在接种疫苗后第6天开始迅速增加，并持续增加直至致命。通过中肠切片观察发现，这一转变与细胞核增大的细胞数量增加的时期一致。另一方面，对于2型病毒，被认为具有病毒受体功能的病毒抗性/易感性基因nsd-2(+^<nsd-2>)在中肠的表达位点和通过研究两者之间的关系，我们致力于阐明2型病毒的感染机制。我们将2型病毒的靶组织中肠分为前区、中区和后区，并研究了耐药/易感基因在每个区域是否表达。我们发现该基因在后中肠中强烈表达，发现它在前部区域有轻微表达，而在中部区域没有表达。当他们调查2型病毒是否只感染后中肠时，他们发现，与预期相反，在中肠的所有区域都检测到了病毒转录本。这一结果提示了2型病毒感染中可能发生非受体介导的细胞间感染，可以说导致了超核病毒新病毒感染机制的发现。

项目成果

カイコ濃核病ウイルス1型がカイコ幼虫中腸に及ぼす影響

家蚕病毒1型对家蚕幼虫中肠的影响

• 发表时间: 2011
• 作者: Ito K;Shimura S;Kadono-Okuda K;伊藤克彦・城所久良子・志村幸子・門野敬子
• 通讯作者: 伊藤克彦・城所久良子・志村幸子・門野敬子

Bombyx densovirus susceptibility is determined by one amino acid substitution of the Bombyx mori unique membrane protein expressing in the midgut

家蚕浓核病毒敏感性由中肠中表达的家蚕独特膜蛋白的一个氨基酸取代决定

• 发表时间: 2012
• 作者: Ito K;Kidokoro K;Katsuma S;Sezutsu H;Uchino K;Kobayashi I;Tamura T;Yamaraoto K;Mita K;Shimada T;Kadono-Okuda K
• 通讯作者: Kadono-Okuda K

Detailed investigation of the sequential pathological changes in silkworm larvae infected with Bombyx densovirus type 1

• DOI: 10.1016/j.jip.2012.12.005
• 发表时间: 2013-03-01
• 期刊: JOURNAL OF INVERTEBRATE PATHOLOGY
• 影响因子: 3.4
• 作者: Ito, Katsuhiko;Kidokoro, Kurako;Kadono-Okuda, Keiko
• 通讯作者: Kadono-Okuda, Keiko

A conspicuous intoxication in Bombyx mori (Lepidoptera : Bombycidae) caused by a fungicide containing iminoctadine triacetate.

家蚕（鳞翅目：家蚕科）由含有亚氨基辛他定三乙酸酯的杀菌剂引起的明显中毒。

• DOI: 10.1603/an12060
• 发表时间: 2013
• 期刊: Ann. Entomol. Soc. Am.
• 作者: Arakawa T;Ito K;Kidokoro K;Kadono-Okuda K;Yukuhiro F;and Noda H
• 通讯作者: and Noda H

カイコ濃核病ウイルス1型がカイコ幼虫中腸に及ぼす影響の経時的観察

家蚕高核病毒1型对家蚕幼虫中肠影响的时程观察

• 发表时间: 2011
• 作者: Ito K;Shimura S;Kadono-Okuda K;伊藤克彦・城所久良子・志村幸子・門野敬子;伊藤克彦・城所久良子・勝間進・嶋田透・山本公子・三田和英・門野敬子;伊藤克彦・城所久良子・勝間進・嶋田透・山本公子・三田和英・門野敬子;伊藤克彦・城所久良子・志村幸子・門野敬子
• 通讯作者: 伊藤克彦・城所久良子・志村幸子・門野敬子