Role of micro RNA on the Expression of Luteinizing Hormone-Human Chorionic Gonadotropin Receptor Messenger Ribonucleic Acid in rat ovary
微小RNA对大鼠卵巢黄体生成素-人绒毛膜促性腺激素受体信使核糖核酸表达的影响
基本信息
- 批准号:21390448
- 负责人:
- 金额:$ 11.32万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
- 财政年份:2009
- 资助国家:日本
- 起止时间:2009 至 2011
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
MicroRNAs (miRNAs) are small non-coding RNAs that interact with mRNAs and trigger either translation repression or RNA cleavage of target genes. In this study, we investigated whether miRNA is involved in down-regulation of the LH receptor (LHR) in the ovary. A miRNA microarray was carried out to analyze the overall miRNA expression profile while LHR mRNA was down-regulated, and found that 23 miRNAs were highly expressed during this period. Combining these results with data from the bioinformative database, the clustering analysis led us to focus on miR-136* for further analysis. In both in vivo and in vitro studies, miR-136* levels were found to increase 6 hr after hCG administration while LHR mRNA levels were down-regulated. To confirm that miR-136* binds to LHR mRNA, we cloned the 3'-end of LHR mRNA from 2570 to 2895 into reporter vector which contained a Renilla luciferase coding region upstream of the cloning site. When the miR-136* inhibitor was co-transfected with the reporter vector in granulosa cells, the luciferase activity was de-repressed, revealing that miR-136* definitely bound to the 3'-end of LHR mRNA. From these data, we conclude that miR-136* participates in the mechanism of down-regulation of LHR mRNA, whereby miR-136* forms base pairs with LHR mRNA.
microRNA(miRNA)是与mRNA相互作用并触发靶基因的翻译抑制或RNA裂解的小非编码RNA。在这项研究中,我们研究了miRNA是否参与卵巢中LH受体(LHR)的下调。在LHR mRNA下调时,进行了miRNA微阵列以分析整体miRNA表达谱,并发现在此期间高度表达了23个miRNA。将这些结果与来自生物信息数据库的数据相结合,聚类分析使我们专注于miR-136*以进行进一步分析。在体内和体外研究中,发现MiR-136*水平在HCG给药后6小时增加,而LHR mRNA水平下调。为了确认miR-136*与LHR mRNA结合,我们将2570至2895的LHR mRNA的3末端克隆到了记者载体中,其中包含克隆位点上游的肾荧光素酶编码区域。当miR-136*抑制剂与颗粒细胞中的报告载体共转染时,荧光素酶活性被脱位,表明miR-136*绝对与LHR mRNA的3'-end结合。从这些数据中,我们得出结论,miR-136*参与了LHR mRNA下调的机制,其中miR-136*与LHR mRNA形成碱基对。
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
A new system for regulated functional gene expression for gene therapy applications : nuclear delivery of a p16INK4A-estrogen receptor carboxy terminal fusion protein only in the presence of estrogen
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- 影响因子:5.2
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- 通讯作者:Minegishi T
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- 通讯作者:北原慈和
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- 发表时间:2010
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- 影响因子:0
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- 通讯作者:Minegishi T
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- DOI:
- 发表时间:2011
- 期刊:
- 影响因子:0
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- 通讯作者:鈴木ちかる
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