Role of micro RNA on the Expression of Luteinizing Hormone-Human Chorionic Gonadotropin Receptor Messenger Ribonucleic Acid in rat ovary

微小RNA对大鼠卵巢黄体生成素-人绒毛膜促性腺激素受体信使核糖核酸表达的影响

基本信息

  • 批准号:
    21390448
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 11.32万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 财政年份:
    2009
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2009 至 2011
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

MicroRNAs (miRNAs) are small non-coding RNAs that interact with mRNAs and trigger either translation repression or RNA cleavage of target genes. In this study, we investigated whether miRNA is involved in down-regulation of the LH receptor (LHR) in the ovary. A miRNA microarray was carried out to analyze the overall miRNA expression profile while LHR mRNA was down-regulated, and found that 23 miRNAs were highly expressed during this period. Combining these results with data from the bioinformative database, the clustering analysis led us to focus on miR-136* for further analysis. In both in vivo and in vitro studies, miR-136* levels were found to increase 6 hr after hCG administration while LHR mRNA levels were down-regulated. To confirm that miR-136* binds to LHR mRNA, we cloned the 3'-end of LHR mRNA from 2570 to 2895 into reporter vector which contained a Renilla luciferase coding region upstream of the cloning site. When the miR-136* inhibitor was co-transfected with the reporter vector in granulosa cells, the luciferase activity was de-repressed, revealing that miR-136* definitely bound to the 3'-end of LHR mRNA. From these data, we conclude that miR-136* participates in the mechanism of down-regulation of LHR mRNA, whereby miR-136* forms base pairs with LHR mRNA.
microRNA(miRNA)是与mRNA相互作用并触发靶基因的翻译抑制或RNA裂解的小非编码RNA。在这项研究中,我们研究了miRNA是否参与卵巢中LH受体(LHR)的下调。在LHR mRNA下调时,进行了miRNA微阵列以分析整体miRNA表达谱,并发现在此期间高度表达了23个miRNA。将这些结果与来自生物信息数据库的数据相结合,聚类分析使我们专注于miR-136*以进行进一步分析。在体内和体外研究中,发现MiR-136*水平在HCG给药后6小时增加,而LHR mRNA水平下调。为了确认miR-136*与LHR mRNA结合,我们将2570至2895的LHR mRNA的3末端克隆到了记者载体中,其中包含克隆位点上游的肾荧光素酶编码区域。当miR-136*抑制剂与颗粒细胞中的报告载体共转染时,荧光素酶活性被脱位,表明miR-136*绝对与LHR mRNA的3'-end结合。从这些数据中,我们得出结论,miR-136*参与了LHR mRNA下调的机制,其中miR-136*与LHR mRNA形成碱基对。

项目成果

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A new system for regulated functional gene expression for gene therapy applications : nuclear delivery of a p16INK4A-estrogen receptor carboxy terminal fusion protein only in the presence of estrogen
用于基因治疗应用的调节功能基因表达的新系统:仅在雌激素存在的情况下,p16INK4A-雌激素受体羧基末端融合蛋白的核递送
  • DOI:
    10.3892/ijo_00000569
  • 发表时间:
    2010
  • 期刊:
  • 影响因子:
    5.2
  • 作者:
    Tamura T;Kanuma T;Nakazato T;Faried LS;Aoki H;Minegishi T
  • 通讯作者:
    Minegishi T
ラット卵巣LH受容体の発現調節におけるmiRNAの意義
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2010
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Hiroaki Kawato;Tsutomu Tabata;Hiroyuki Minoura;Nao Murabayashi;Ning Ma;Dong Fang Wang;Norimasa Sagawa;北原慈和
  • 通讯作者:
    北原慈和
ゴナドトロピンレセプターによる卵巣機能調節
促性腺激素受体对卵巢功能的调节
  • DOI:
  • 发表时间:
    2010
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Nabeshima H;Nishimoto M;Utsunomiya H;Arai M;Ugajin T;Terada Y;YaegashiN;峯岸敬
  • 通讯作者:
    峯岸敬
Regulation of gonadotropin receptor
促性腺激素受体的调节
  • DOI:
  • 发表时间:
    2010
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    中村充宏;京哲;高倉正博;橋本学;水本泰成;森紀子;生駒友美;井上正樹;Minegishi T
  • 通讯作者:
    Minegishi T
ヒト羊膜間葉系細胞と上皮細胞におけるTNF-alphaのactivin A発現促進作用
TNF-α促进人羊膜间充质细胞和上皮细胞激活素A表达的作用
  • DOI:
  • 发表时间:
    2011
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Ichikawa Y;Ishikawa T;Shimizu D;Goto A;Shimamura T;Suwa H;Tatsumi K;Watanabe K;Ota M;Fujii S;Kawamata M;Akimoto K;Nagashima Y;Takahashi H;Nakajima A;Ohno S;Endo I;東 治人;鈴木ちかる
  • 通讯作者:
    鈴木ちかる
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