腎不全時における有機アニオントランスポータ発現変動の分子機構解明

阐明肾衰竭期间有机阴离子转运蛋白表达变化的分子机制

基本信息

批准号：
13771412
负责人：
増田智先
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

ヒトにおける腎不全モデル動物として繁用されている5/6腎摘出ラットを用い、腎不全の進展に伴う尿細管有機アニオントランスポータ群の発現変動を分子的・機能的に明らかにすることを目的として系統的な解析を行い、以下の研究成果を得た。5/6腎摘出2週間後の腎におけるOAT-K1、OAT-K2、OCT2 mRNAレベルは著しく低下していた。同時にin vivo体内動態実験を行ったところ、アニオン性抗癌剤メトトレキサート(MTX)並びにカチオン性H2阻害薬シメチジンの腎クリアランスは5/6腎摘出群で対照模擬処置群の20%に迄低下していた。一方、OAT-Kと同様に尿細管管腔側に局在し、MTXを輸送する有機アニオントランスポータMRP2の発現量は5/6腎摘出群で維持されること、血管側側底膜においてイオン性薬物の細胞内取り込みを媒介するOAT1、OAT3,OCT1発現は5/6腎摘出による影響を受けないことが示された。さらに、模擬処置群ではフォリン酸投与によるMTXの尿中排泄促進効果が認められたのに対し、5/6腎摘出群ではフォリン酸投与によるMTX腎挙動の変化は観察されなかった。同時に、5/6腎摘出ラットに微量のテストステロンを負荷したところ、OCT2発現の回復とシメチジンクリアランスの再上昇が認められ、腎不全に伴うカチオン性薬物の腎排泄能低下には、一部血清テストステロン濃度の低下に起因するOCT2発現低下によることが示唆された。以上、腎局在性有機イオントランスポータOAT-K並びにOCT2は、病変の進展に伴う発現変化とそれに伴う薬物腎排泄挙動の変化に深く関わることが明らかとなった。さらに、OCT2については腎病変そのもののみならず血清テストステロン濃度にも機能的・分子的に調節されることがin vivoレベルで明らかとなった。これらの研究成果は、イオン性薬物の尿中排泄機構を詳細に理解する上で有用な基礎情報を提供するのみならず、病態時における尿細管有機イオントランスポータ群の発現変動に着目した薬物の適正使用法確立の重要性を明らかにするものと考える。

我们使用经常用作人类肾衰竭模型动物的5/6肾切除大鼠，旨在从分子和功能上阐明肾小管有机阴离子转运蛋白随着肾衰竭进展而表达的变化。以下研究结果。 5/6 肾切除术后两周，肾脏中的 OAT-K1、OAT-K2 和 OCT2 mRNA 水平显着降低。同时进行体内药代动力学实验，5/6肾切除组中阴离子抗癌药甲氨蝶呤（MTX）和阳离子H2抑制剂西咪替丁的肾清除率降低至对照假治疗组的20%。另一方面，在5/6肾切除组中，与OAT-K一样，转运MTX并位于肾小管管腔侧的有机阴离子转运蛋白MRP2的表达水平得以维持，而OAT1的表达水平也得到维持。、OAT3 和 OCT1 介导细胞内性药物的摄取，不受 5/6 肾切除术的影响。此外，在假治疗组中，亚叶酸给药促进了MTX的尿排泄，而在5/6肾切除组中，没有观察到亚叶酸给药导致MTX肾脏行为发生变化。同时，当5/6肾切除的大鼠负载少量睾酮时，观察到OCT2表达恢复和西咪替丁清除率重新增加，这表明这是由于OCT2表达减少所致。浓度降低。如上所述，已揭示肾脏局部有机离子转运蛋白OAT-K和OCT2与伴随病变进展的表达变化以及相关的肾脏药物排泄行为的变化密切相关。此外，在体内水平上已经清楚的是，OCT2 的功能和分子调节不仅受到肾脏病变本身的调节，而且还受到血清睾酮水平的调节。这些研究结果不仅为详细了解离子型药物的尿排泄机制提供了有用的基础信息，而且为理解离子型药物的尿排泄机制提供了有用的基础信息，我们相信这将阐明建立正确用法的重要性。