アクアビルナウイルス感染症に対するDNAワクチンの開発

开发针对水双病毒感染的 DNA 疫苗

基本信息

批准号：
01F00123
负责人：
鈴木聡
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01F00123/
关键词：
Marine Birnavirus DNA Vaccine RNA polymerase Polyprotein Virus gene

项目摘要

近年ヒラメ種苗生産現場等で突発的に発生するアクアビルナウイルス感染症に対するDNAワクチンを開発するための研究を行ない,下記の成果を得た。まず,DNAワクチンを開発するためには,ウイルスの全遺伝子配列とその株間の差異を解明した。RNA dependent RNA polymeraseの遺伝子を解読した結果,本遺伝子は株間で高度に保存的な配列をもつことが明らかになった。しかし,サケ科魚類のビルナウイルスIPNVとは違いが見い出され,アクアビルナウイルスは本遺伝子の比較から3ゲノタイプにわけられ,マリンビルナウイルス(MABV)全株は同一のタイプに分類された。(Archives of Virology, 148, 745-758, 2003,に発表)つぎに,ウイルス主要抗原を担うVP2をふくむ分節Aの全塩基配列を決定し,種々のビルナウイルスと比較した。その結果,MABVの分節AはIPNVや鳥類,昆虫のビルナウイルスと完全に分離されたゲノグループを形成し,MABVはあたらしいゲノグループとすべきであることを提唱した(投稿中)。上記の塩基配列解析から,分節Aの数カ所を標的としたDNAワクチンを作成した。種々の発現ベクターと遺伝子の組み合わせを行ない,VP2とVP3遺伝子を組み込んだ5種の候補ワクチンを完成させた。大腸菌中では良好な発現をした。今後は,魚類(ブリ)を使ったin vivoテストを行う。MABVに対するDNAワクチンを作成したのは今回が世界初であり,今後効果に期待が持てる。

近年来，我们针对牙鲆苗生产现场突然发生的水生病毒感染进行了DNA疫苗的开发研究，并取得了以下成果。首先，为了开发DNA疫苗，需要阐明病毒的整个基因序列及其毒株之间的差异。对RNA依赖性RNA聚合酶基因进行解码的结果表明，该基因在菌株中具有高度保守的序列。然而，鲑鱼的双RNA病毒IPNV之间存在差异，根据该基因的比较，水生双RNA病毒被分为三个基因型，并且所有海洋双RNA病毒（MABV）株都被归入同一类型。 (发表于Archives of Virology, 148, 745-758, 2003) 接下来，确定了包含携带主要病毒抗原的VP2的A片段的完整核苷酸序列，并与各种双病毒的序列进行了比较。因此，MABV A 片段形成了一个与 IPNV、禽类和昆虫双RNA病毒完全分离的基因组群，我们建议 MABV 应该是一个新的基因组群（目前已提交）。基于上述核苷酸序列分析，我们创建了一种针对A片段中多个位点的DNA疫苗。通过组合各种表达载体和基因，我们完成了五种包含VP2和VP3基因的候选疫苗。在大肠杆菌中观察到良好的表达。今后，我们将使用鱼（黄尾鱼）进行体内测试。这是世界上首次研制出针对 MABV 的 DNA 疫苗，我们对其未来的有效性寄予厚望。