プレT細胞受容体を介するT細胞分化機構の解析

前T细胞受体介导的T细胞分化机制分析

基本信息

批准号：
20590500
负责人：
山崎晶
金额：
$ 2.16万
依托单位：
Kyushu University (2009)The Institute of Physical and Chemical Research (2008)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20590500/
关键词：
免疫学リンパ球 T細胞分化

项目摘要

・プレTCRα鎖(pTα)ノックインマウスの樹立マウスpTαゲノムを単離し、荷電アミノ酸(D22,R24,R102,R117)をそれぞれアラニン(A)に変異させ、intron部分にloxP-neo-loxP、長腕の外側にDTカセットを挿入したベクターをES細胞(Bruce4)に導入し、相同組み換えクローンを取得した。ES由来のキメラマウス7匹をC57BL/6に交配し、germline transmissionが完了した個体を樹立することができた。更に、当該マウスを交配してKI/KIマウスを樹立し、プレTCRを介するT細胞分化シグナルが障害されていることを見出した。T細胞分化に必須のレセプター、プレTCRが、リガンド非依存的にユニークな自己会合能を介してシグナルを伝えていることを個体レベルで示した初めての例となった。・プレTCR特異的なシグナル伝達経路の解析TCR下流でNFkB経路の活性化に必須の役割なアダプター、Bcl10欠損マウス、またNFkB2経路に必須なNIKの変異型、NIK^<aly/aly>マウス、及び二重変異マウスにおいても、プレTCRシグナル、プレTCRによる胸腺細胞分化は全く正常に認められることが明らかとなった。また、βセレクションに伴って誘導される遺伝子群に関しても、これら変異マウスにおいて全く正常に誘導されることが判明した。この結果より、成熟TCRにおいては必須の役割を果たすNFkB経路が、プレTCRにおいては必要でない、すなわち、未熟TCRと成熟TCRとでは、細胞内の伝達の機構が全く異なることが判明した。構造的には類似した受容体を介するシグナルが、分化段階によって劇的に異なる応答の惹起へと繋がる分子機構を解く手がかりとなると考えられる。

- 分离出既定的小鼠PTα基因组（PTα）敲门小鼠，将带电的氨基酸（D22，R24，R102，R117）突变为丙氨酸（a），并将载体含有Loxp-Neo-loxp插入了内含物和dt cassette cassette cassette的载体（获得重组克隆。从ES得出的七只嵌合小鼠与C57BL/6配对，并建立了完全生殖线传播的个体。此外，将小鼠配对以建立Ki/Ki小鼠，并发现预先TCR介导的T细胞分化信号受损。这是第一次，在单个级别上，Pre-TCR是T细胞分化必不可少的受体，以独立的方式通过独特的自我关联势传输信号。对TCR前信号通路的分析已经表明，在TCR，BCl10缺乏小鼠的TCR，Bcl10缺陷小鼠和Nik nik，Nik^<Aly/Aly/Aly/Alyy> mutant> mutant> mutant> Mutant> mutant和Double Intiveuts和dibodut突变的ADAPTER中，TRE前TCR信号和胸腺触发前的胸腺细胞分化是完全正常的。还发现，在这些突变小鼠中完全诱导了β选择诱导的基因。这些结果表明，在成熟的TCR中起着至关重要的作用的NFKB途径在TRE-TCR中不需要，即，未成熟的TCR和成熟TCR之间的细胞内传递机理完全不同。人们认为在结构相似的受体介导的信号被认为为分子机制提供了线索，从而导致根据分化阶段诱导急剧不同的反应。