情報伝達とリンパ球の機能分化

淋巴细胞的信息传递和功能分化

基本信息

批准号：
08282105
负责人：
宮園浩平
金额：
$ 109.25万
依托单位：
Japanese Foundation For Cancer Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

1.TGF-βはBリンパ球に作用してIgAの産生を促進する。一方PEBP2ファミリーの転写因子のうちPEBP2αCもBリンパ球の分化に関与している。本研究でSmad3とPEBP2αCが細胞内で結合することを示した。またIgCαのプロモーター領域にPEBP2とSmadの結合領域があり、Smad3がPEBP2αCと協調して転写活性を促進し、TGF-βの核内のターゲットとしてPEBP2が作用していることを明らかにした。2.IL-6依存性に増殖するハイブリドーマMH60細胞にBMP2を添加するとIL-6存在下にアポトーシスによる細胞死を誘導することが明らかとなった。このアポトーシスはTAK1キナーゼの上昇の結果、p38MAPキナーゼが活性化されるためであることが確認された。また抑制型SmadであるSmad6はBMP2によるアポトーシスを抑制した。3.メモリーB細胞の分化に関与する転写因子BCL6の活性がヒストン脱アセチル化酵素(HDAC)の阻害剤であるトリコスタチンAによって消失することを明らかにした。BCL6はHDACをリクルートし、BCL6を発現している細胞にトリコスタチンAを加えるとアポトーシスが起こらなくなることから、HDACを介してメモリーB細胞にアポトーシスを誘導していることが明らかとなった。4.サイトカインの機能を負に調節する因子CIS1のトランスジェニックマウスを作成した。このマウスのリンパ球はIL-2の反応が弱いなどさまざまな表現型を示し、STAT5aとSTAT5bのノックアウトマウスと極似しており、CIS1がSTAT5の作用を個体レベルで抑制していることが証明された。

1.TGF-β作用于B淋巴细胞，促进IgA产生。另一方面，在PEBP2家族转录因子中，PEBP2αC也参与B淋巴细胞的分化。在这项研究中，我们证明 Smad3 和 PEBP2αC 在细胞中结合。我们还发现，IgCα启动子区域存在PEBP2和Smad的结合区域，Smad3与PEBP2αC协同促进转录活性，并且PEBP2充当TGF-β的核靶标。 2.向以IL-6依赖性方式增殖的杂交瘤MH60细胞中添加BMP2，在IL-6存在下通过细胞凋亡诱导细胞死亡。证实这种细胞凋亡是由于TAK1激酶增加导致p38MAP激酶激活所致。此外，Smad6（一种抑制性 Smad）可抑制 BMP2 诱导的细胞凋亡。 3.我们发现BCL6（一种参与记忆B细胞分化的转录因子）的活性被曲古抑菌素A（一种组蛋白脱乙酰酶（HDAC）抑制剂）所消除。 BCL6招募HDAC，当将曲古抑菌素A添加到BCL6表达细胞中时，不发生细胞凋亡，表明BCL6通过HDAC诱导记忆B细胞凋亡。 4. 我们创建了 CIS1 转基因小鼠，CIS1 是一种负向调节细胞因子功能的因子。该小鼠的淋巴细胞表现出各种表型，包括对IL-2的弱反应，并且与STAT5a和STAT5b敲除小鼠非常相似，证明CIS1在个体水平上抑制了STAT5的作用。