チラコイド膜局在性イミュノフィリンおよび相互作用するタンパク質の生理機能の解明

阐明类囊体膜定位亲免蛋白和相互作用蛋白的生理功能

• 批准号: 05F05449
• 负责人: 久堀 徹
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05F05449/
• 关键词: イミュノフィリン; 葉緑体; TAPタグ; 蛋白質間相互作用

本研究では、葉緑体チラコイド膜ルーメンに存在するイミュノフィリンの生化学的な性質および生理学的な重要性を明らかにすることを目指している。特に、イミュノフィリン蛋白質が相互作用する相手の同定を研究目的の一つにおいており、本年度は、下記のような研究を実施した。(1)葉緑体に局在するイミュノフィリンのうち、12種類のFKBPについて発現系を構築した。(2)これらのプラスミドで大腸菌を形質転換し、可溶性の蛋白質を得て、10種類については、特異抗体の作成ができた。(3)新たに作成した抗体を用いて、野生型および変異イミュノフィリンで形質転換したシロイヌナズナについてチラコイド膜タンパク質の分析を行った。その結果、FKBP16-1がLHCIIと共局在すること、16-2,19がPSIと共局在すること、16-4,18がPSIIと共局在することを明らかにした。(4)タンデムアフィニティー精製用タグをもった5種類の葉緑体イミュノフィリンの発現系を構築し、シロイヌナズナの形質転換を行ったが、結果はまだ得られていない。

在这项研究中，我们旨在阐明非元素在叶绿体膜腔中的生化特性和生理重要性。特别是，研究目的之一是识别与依非素蛋白相互作用的对手，今年我们进行了以下研究。 （1）在12种类型的FKBP中，在叶绿体中构建了表达系统。 （2）这些质粒转化为可溶性蛋白的大肠杆菌，可以为10种类型的类型创建特定的抗体。 （3）使用新创建的抗体，我们分析了一种以野生和突变的Imunphillin的形式转化的氟烷膜蛋白。结果，它指出，FKBP16-1位于LHCII，16-2，19位于PSI中，16-4和18位于PSII中。 （4）构建了五种具有标记的串联亲和力精制标签的五种类型的叶绿体伊甘球蛋白的表达，并进行了音节nazuna的转换，但尚未获得结果。