35型アデノウイルスベクターシステムの開発

35型腺病毒载体系统的研制

基本信息

批准号：
15689003
负责人：
水口裕之
金额：
$ 16.39万
依托单位：
National Institute of Health Sciences
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は35型アデノウイルスベクターシステムの開発研究として以下の結果を得た。1. 研究代表者らはin vitroライゲーションに基づいたプラスミド構築を利用した簡便なアデノウイルスベクター作製法を開発済みである。そこで、本原理を35型アデノウイルスベクターの作製にも応用し、誰でも簡便に35型アデノウイルスベクターの作製が可能となるシステムの開発に成功した。2. 35型アデノウイルスベクターの臨床応用に向けて、35型アデノウイルスベクターのin vivo遺伝子導入特性を明らかにすることは必要不可欠と思われるが、CD46がマウスで発現していないためマウスをモデル動物として使用することは不可能である。そこで本研究では、CD46安定発現細胞およびCD46TGマウスを用いて35型アデノウイルスベクターのin vitroおよびin vivo遺伝子導入特性について検討した。その結果、35型アデノウイルスベクターがin vitroおよびin vivo遺伝子導入において、CD46を認識し細胞に感染することが確認された。しかしながら、ヒトCD46TGマウスへの全身投与によるin vivo遺伝子導入効率は5型アデノウイルスベクターと比べると依然低く、今後、第2受容体の同定などさらなる検討が必要であると思われた。3. 35型アデノウイルスベクターによる遺伝子導入活性を5型アデノウイルスに対する抗体存在下で検討したところ、遺伝子導入活性の減弱は認めらなかった。成人のほとんどは5型アデノウイルスに対する抗体を有しているが、35型アデノウイルスに対する抗体保持率は低いこと等も考え合わせると、35型アデノウイルスベクターはアデノウイルス抗体を保持しているヒトにおいても効果が期待できること、5型アデノウイルスベクター投与後の2度目のベクター投与に利用できることが明らかとなった。

今年，作为35型腺病毒载体系统开发研究的一部分，获得了以下结果。 1。研究人员已经开发了一种基于体外连接的质粒构造产生腺病毒载体的简单方法。因此，该原理应用于生产35型腺病毒载体，并成功地开发了一个使任何人都可以轻松创建35型腺病毒载体的系统。 2。对于35型腺病毒载体的临床应用，阐明35型腺病毒载体的体内基因转移特性似乎至关重要，但是由于CD46在小鼠中未表达，因此不可能将小鼠用作模型动物。因此，在这项研究中，我们使用CD46稳定的表达细胞和CD46TG小鼠研究了35型腺病毒载体的体外和体内基因转移特性。结果，已经证实，在体外和体内基因转移期间，35型腺病毒载体识别CD46并感染细胞。但是，与5型腺病毒载体相比，全身给药对人CD46TG小鼠的体内基因转移的效率仍然很低，并且将来可能需要进行进一步的研究，例如鉴定第二受体的鉴定。 3。当在存在针对5型腺病毒的抗体的情况下检查了35型腺病毒载体的基因转移活性时，未观察到基因转移活性的衰减。大多数成年人对5型腺病毒均具有抗体，但是考虑到针对35型腺病毒的抗体保留率很低，已经表明，35型腺病毒载体可以预期有效，可在携带腺病毒抗体的人类中有效，并且可以用于后载体的第二次使用5 Adenov e adenovir的载体。

项目成果

期刊论文数量（6）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

カプシドタンパク質を改変した改良型アデノウイルスベクターによる高効率遺伝子導入

使用带有修饰衣壳蛋白的改良腺病毒载体进行高效基因转移

DOI：
发表时间：
期刊：
BIO INDUSTRY (印刷中)
影响因子：
0
作者：
Mizuguchi;H. et al.
通讯作者：
H. et al.

Sakurai F., Mizuguchi H., Hayakawa T: "Efficient gene transfer into human CD34+ cells by an adenovirus type 35 vector."Gene Ther.. 10. 1041-1048 (2003)

Sakurai F.、Mizuguchi H.、Hayakawa T：“通过 35 型腺病毒载体将基因有效转移到人 CD34 细胞中。”Gene Ther.. 10. 1041-1048 (2003)

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Efficient gene transfer into human trophoblast cells with adenovirus vector containing chimeric type 5 and 35 fiber protein.

DOI：
10.1248/bpb.27.2046
发表时间：
2004-12
期刊：
Biological & pharmaceutical bulletin
影响因子：
2
作者：
N. Koizumi;H. Mizuguchi;M. Kondoh;M. Fujii;T. Hayakawa;Yoshiteru Watanabe
通讯作者：
N. Koizumi;H. Mizuguchi;M. Kondoh;M. Fujii;T. Hayakawa;Yoshiteru Watanabe

Approaches to improve the kinetics of adenovirus delivered gene and gene product.

改善腺病毒传递基因和基因产物动力学的方法。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Adv.Drug.Deli.Rev. 57
影响因子：
0
作者：
Xu Z.L.;Mizuguchi H.;Koizumi N.;Sakurai F.;Hosono T.;Kawabata K.;Watanabe Y.;Yamaguchi T.;Hayakawa T.
通讯作者：
Hayakawa T.

Sakurai F., Mizuguchi H., Yamaguchi T., Hayakawa T: "Characterization of in vitro and in vivo gene transfer properties of adenovirus serotype 35 vector."Mol.Ther.. 8. 813-821 (2003)

Sakurai F.、Mizuguchi H.、Yamaguchi T.、Hayakawa T：“腺病毒血清型 35 载体的体外和体内基因转移特性的表征。”Mol.Ther.. 8. 813-821 (2003)