P-糖蛋白質の正常機能解析と誘導発現機構解析に基づいた多剤耐性克服法の開発

基于P-糖蛋白正常功能分析和诱导表达机制分析，开发克服多药耐药性的方法

基本信息

批准号：
04152066
负责人：
植田和光
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.pー糖蛋白質の生理的基質の解明P-糖蛋白質の生理的基質を解明するため、経細胞輸送実験系を確立し、P-糖蛋白質によるステロイドホルモン輸送を検討した。その結果、Pー糖蛋白質が副腎において生理作用としてコルチゾールなどのステロイドホルモンの分泌に関与していること、プロゲステロンはP-糖蛋白質の機能を調節している可能性が示唆された。さらに、強心配糖体ジゴキシンの腎尿細管分泌がPー糖蛋白質を介していること、臨床上問題となるキニジン、ベラパミル併用時のジゴキシン腎クリアランス低下が、腎近位尿細管におけるPー糖蛋白質の阻害に起因することが示唆された。2.Pー糖蛋白質と阻害剤の相互作用Pー糖蛋白質の阻害剤として知られる種々のカルシウムチャネル阻害剤およびサイクロスポリンA、FK506を、Pー糖蛋白質が輸送するか検討した。カルシウムチャネル阻害剤のうち、ベラパミル、アジドピン、ヂルチアゼムはPー糖蛋白質によって輸送されたが、ニトレンヂピンはPー糖蛋白質と相互作用するにもかかわらず輸送されなかった。さらにサイクロスポリンAとFK506も輸送されることが明らかになった。3.癌抑制遺伝子によるMDR1遺伝子発現の制御癌遺伝子rasや癌抑制遺伝子p53のMDR1遺伝子発現に与える影響を、MDR1遺伝子プロモーター領域をCAT遺伝子につないだレポータープラスミドを、rasや変異p53などの癌遺伝子発現ベクターと共に細胞内に導入することによって検討した。その結果、これらの癌遺伝子および癌抑制遺伝子によってMDR1遺伝子のプロモーター活性が影響を受けることが明らかになり、癌の進行に伴ってMDR1遺伝子が活性化される可能性が示唆された。

1. P-糖蛋白生理底物的阐明为了阐明P-糖蛋白的生理底物，我们建立了跨细胞转运实验体系，并研究了P-糖蛋白对类固醇激素的转运。结果表明，P-糖蛋白参与皮质醇等类固醇激素的分泌，作为肾上腺的生理作用，而黄体酮可能调节P-糖蛋白的功能。此外，强心苷地高辛的肾小管分泌是由P-糖蛋白介导的，当奎尼丁和维拉帕米一起使用时地高辛肾清除率降低（这是一个临床问题）是由于肾近曲小管中的P-糖蛋白造成的。有人认为这是由于抑制2. P-糖蛋白和抑制剂之间的相互作用我们研究了P-糖蛋白是否转运各种钙通道抑制剂、环孢菌素A和FK506，这些抑制剂被称为P-糖蛋白的抑制剂。在钙通道抑制剂中，维拉帕米、叠氮平和地尔硫卓通过P-糖蛋白转运，但尼群地平尽管与P-糖蛋白相互作用，但不被转运。此外，还发现环孢菌素A和FK506也被转运。 3.抑癌基因对MDR1基因表达的控制我们通过使用将MDR1基因启动子区域与CAT基因连接到癌基因如ras和p53的报告质粒，研究了癌基因ras和抑癌基因p53对MDR1基因表达的影响。该研究是通过将其与表达载体一起引入细胞来进行的。结果显示，MDR1基因的启动子活性受到这些癌基因和抑癌基因的影响，这表明MDR1基因可能随着癌症的进展而被激活。