ガンマ切断によるアミロイド産生とタウ蛋白リン酸化によるタウ線維形成の機序

γ 裂解产生淀粉样蛋白和 tau 蛋白磷酸化形成 tau 原纤维的机制

基本信息

批准号：
03F03136
负责人：
武田雅俊
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03F03136/
关键词：
アルツハイマー病タウ蛋白 14-3-3蛋白リン酸化

项目摘要

アルツハイマー病の神経原線維変化の主要構成成分として異常リン酸化タウ蛋白があり、これはリン酸化にともなって神経細胞内に異常に蓄積させることが知られている。リチウムはグリコーゲンシンターゼキナーゼ3(GSK3)を抑制して、このタウ蛋白のいくつかの部位を脱リン酸化するが、リチウムによって逆にリン酸化が誘導される部位(Ser214)が存在することを発見した。さらに、2種のキナーゼPKAおよびPKBによりin vitroにてリン酸化されたタウ蛋白とリン酸化していないタウ蛋白にリコンビナント14-3-3蛋白を添加し抗14-3-3蛋白抗体にて免疫沈降したものでは、キナーゼによるリン酸化後の沈降物のタウ蛋白量が増加し、リン酸化によってタウ蛋白と14-3-3蛋白との結合が増加することが判明した。アミノ酸変異を導入したリコンビナント蛋白Tau-S214Aおよび野生型Tau-wtをキナーゼによるリン酸化をおこなって結合を調べると、Tau-wtのみに14-3-3蛋白との結合が増加した。これに、リチウム添加後の細胞内タウ蛋白と14-3-3蛋白との結合を検討すると、Tau-wtのみにリチウム添加後の沈降物のタウ蛋白量が増加し、細胞内タウ蛋白と14-3-3蛋白との結合がSer214部位のリン酸化に特異的に増加すること示唆された。これらのことから、タウ蛋白のSer214部位のリン酸化は14-3-3蛋白との結合を介して、タウ蛋白の局在や機能、さらにはタウ蛋白の自己重合による蓄積を抑制する可能性、およびアルツハイマー病における神経細胞死を抑制する可能性が示唆された。

异常的磷酸化tau蛋白是阿尔茨海默氏病神经纤维缠结的主要组成部分，众所周知，它会在磷酸化后引起神经元内异常的积累。锂抑制糖原合酶激酶3（GSK3）并去磷酸化该tau蛋白的几个位点，但我们发现有一个位点（SER214），其中锂偶然诱导磷酸化。此外，当将重组14-3-3蛋白添加到tau蛋白中时，在体外和tau蛋白中磷酸化时，未被两种类型的激酶PKA和PKB磷酸化，并通过抗14-3-3-3蛋白抗体在降水酶中增加量酶的量，并用抗14-3-3-3蛋白的磷酸化量增加磷酸化的量，从而磷酸化，并免疫沉淀。在tau蛋白和14-3-3蛋白之间。当重组蛋白Tau-S214a和与氨基酸突变引入的野生型Tau-WT的结合通过激酶通过磷酸化检查时，Tau-WT与14-3-3蛋白的结合仅增加了Tau-wt。此外，在添加锂后的细胞内tau蛋白与14-3-3蛋白的结合时，建议单独将锂后锂添加到tau-wt中的沉积物中的tau蛋白量增加，这表明细胞内tau蛋白在磷酸化中的14-3-3蛋白在磷酸化中的结合增加了14-3-3-3蛋白。这些结果表明，通过与14-3-3蛋白结合的tau蛋白Ser214位点的磷酸化可能抑制tau蛋白的定位和功能，以及由于tau蛋白的自聚合引起的积累，并可能抑制阿尔茨海默氏病中神经元细胞死亡。