アルツハイマー病細胞における中間径線維蛋白のリン酸化と細胞障害に関する研究

阿尔茨海默病细胞中间纤维蛋白磷酸化与细胞损伤的研究

基本信息

批准号：
06670961
负责人：
武田雅俊
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

アルツハイマー病脳から精製したタウ蛋白は過剰にリン酸化されていることが知られている。タウ蛋白の過剰リン酸化はチュブリン重合促進作用を失わせることにより細胞機能を障害する。同じく軸索を構成する蛋白の内、ニューロフィラメント(NF)は、NF-L、NF-M、NF-Hの異なる3つのサブユニットからなる中間径線維であるが、そのいずれもリン酸化されやすい蛋白であり、NF-Lのリン酸化によりNFの重合能が低下すること、NF-Hのリン酸化により他の細胞骨格線維との相互作用が低下することが低下することが知られている。本研究では、アルツハイマー病におけるNFの変化について、NF-Lに対するモノクロナール抗体、NF-Hのリン酸化及び非リン酸化エピトープに対する抗体を用いて、アルツハイマー病脳組織の免疫組織化学及びウエスタンブロットを行った。NF-LのC末端テイル領域にに対する抗体を用いた免疫組織では、その抗体でアルツハイマー病脳における変成神経細胞及び変成神経突起を染色することが認められた。ウエスタンブロットを用いた検討では、アルツハイマー病脳では、対照脳に対し、NF-Lの減少が認められた。また、リン酸化及び非リン酸化NF-Hの割合についてNF-Lとの比で検討すると、アルツハイマー病ではリン酸化NF-Hの割合が増加していることが示された。アルツハイマー病では、リン酸化/脱リン酸化気候の障害が指摘されており、NFも障害されていることが示された。NFを含めた中間径線維の異常もアルツハイマー病の病態に大きく関与していることが考えられ、タウ蛋白ばかりでなく他の中間径線維の変化に注目すべき事が示唆された。

已知从阿尔茨海默氏病大脑纯化的tau蛋白被过度磷酸化。 tau蛋白的过度磷酸化通过失去其微管蛋白聚合启动子效应来损害细胞功能。在组成轴突的蛋白质中，神经丝（NFS）是由三个不同亚基组成的中间纤维：NF-L，NF-M和NF-H，所有这些都很容易成为磷酸化的蛋白质，并且已知NFS的磷酸化降低了NFS与NFS的磷酸化的能力，而NFS则与NFS的能力相同，并替代了NF的能力。纤维。在这项研究中，阿尔茨海默氏病中NF的变化是免疫组织化学和使用对NF-L的单克隆抗体，NF-H和非磷酸化表位的磷酸化的单克隆抗体，对阿尔茨海默氏病脑组织的蛋白质印迹。在使用针对NF-L的C末端尾部区域的抗体的免疫组织中，观察到抗体在阿尔茨海默氏病大脑中变形神经元和变形神经突。蛋白质印迹研究表明，在阿尔茨海默氏症的大脑中，在对照大脑中观察到NF-L的降低。此外，在检查磷酸化和非磷酸化的NF-H与NF-L之比时，表明阿尔茨海默氏病的磷酸化NF-H的比率增加。在阿尔茨海默氏病中，已经注意到磷酸化/去磷酸化气候的疾病，表明NF也受到损害。人们认为，包括NF在内的中间纤维中的异常也很大程度上参与了阿尔茨海默氏病的病理学，这表明不仅应注意tau蛋白的变化，而且还应注意其他中间纤维的变化。