T細胞レセプターペプチドを用いたループスモデルマウス治療に関する研究

T细胞受体肽治疗狼疮模型小鼠的研究

基本信息

批准号：
13770240
负责人：
藤井隆夫
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

自己反応性CD4^+αβTh1細胞として、ヒストンとdsDNAに反応して増殖し抗dsDNA抗体の産生を刺激するdna51と、抗U1RNP抗体の産生を刺激するrnp2とが分離された。dna51はVβ8.3を有し、TCRβ鎖CDR3部位は酸性アミノ酸を多く含んでいた。一方rnp2はVβ14を有していた。なおi-dna51、i-rnp2は抗CD3抗体刺激によりs-dna51、s-rnp2と同レベルのIFNγを分泌した。またi-dna51はPMA/ionomycin刺激によりs-dna51と同様にCD40Lを発現し、in vitroで精製MRL/lpr B細胞の増殖を刺激したが、その増殖は抗CD40Lモノクローナル抗体で阻害された。Adoptive transfer studyでは、PBS注射群に比しs-dna51移入群でループス腎炎の活動性指標が有意に上昇し、糸球体細胞数とメサンギウム領域面積が拡大した。一方i-dna51移入群では、PBS群に比し抗dsDNA抗体価の上昇が抑制され、糸球体腎炎の活動性指標は低下、糸球体細胞数も減少した。s-rnp2移入群でも最終観察時のみ抗dsDNA抗体価上昇が抑制されたが、糸球体腎炎の活動性指標に変動はなく、間質性腎炎が増悪していた。なおi-dna51移入群で、最終観察時脾細胞中のCD4^+Vβ8.3T細胞とB細胞数がPBS注射群に比し有意に減少した。i-dna51移入群最終観察時血清中に抗dna51抗体が認められたが、同血清はrnp2およびdna51以外のVβ8.3陽性T細胞と反応しなかった。EAEと同様、MRL/lprマウスでも放射線照射した自己反応性CD4^+αβTh1細胞クローンの移入でMRL/lprマウスの自己抗体産生および病態の調節が可能である。特にi-dna51を移入したMRL/lprマウスで認められた抗dsDNA抗体産生抑制の機序として、移入クローン(dna51)に対する抗体の誘導が重要と考えられた。この手法を用いることにより病態に関与する自己反応性T細胞を標的とした抗体療法の可能性も示唆される。

作为自动反应性CD4^+αβTH1细胞，DNA51响应组蛋白和DsDNA增殖，并刺激抗DSDNA抗体的产生，RNP2，刺激抗U1RNP抗体的产生。 DNA51具有Vβ8.3，TCRβ链CDR3位点富含酸性氨基酸。另一方面，RNP2具有Vβ14。此外，通过刺激抗CD3抗体，I-DNA51和I-RNP2在与S-DNA51和S-RNP2相同的水平和S-RNP2的水平上分泌IFNγ。此外，I-DNA51通过刺激PMA/离子霉素以与S-DNA51相同的方式表达CD40L，并在体外刺激了纯化的MRL/LPR B细胞的增殖，但其增殖受到抗CD40L单支抗体的增殖。在收养转移研究中，与PBS注射组相比，S-DNA51转移组的狼疮肾炎的活性指标显着增加，导致肾小球细胞的数量增加和肾小球区域。另一方面，与PBS组相比，I-DNA51转移组抑制了抗DSDNA抗体滴度的增加，肾小球肾炎的活性指标减少，肾小球素的数量也减少。在S-RNP2引入组中，仅在最终观察结果中抑制了抗DSDNA抗体滴度，但是肾小球肾炎的活性指标没有变化，并且间质肾炎加剧了。此外，与PBS注入组相比，在最终观察结果的I-DNA51转移组中，在最终观察结果下，脾细胞中CD4^+Vβ8.3T细胞的数量显着减少。在对I-DNA51组的最后一次观察中，在血清中观察到抗DNA51抗体，但是血清除RNP2和DNA51以外的Vβ8.3阳性T细胞没有反应。与EAE相似，MRL/LPR小鼠也可以通过辐照的自身反应性CD4^+αβTH1细胞克隆转移，以调节MRL/LPR小鼠的自身抗体产生和病理学。诱导转移克隆（DNA51）的抗体被认为是抑制抗DSDNA抗体产生的机制，特别是在用I-DNA51转移的MRL/LPR小鼠中。使用该技术还表明，靶向涉及病理学的自身反应性T细胞的抗体疗法的可能性。