遺伝性脊髄小脳失調症の新しいポリグルタミン病遺伝子のクローニング

遗传性脊髓小脑共济失调新多聚谷氨酰胺疾病基因的克隆

• 批准号: 12210051
• 负责人: 中村 浩一郎
• 金额: --
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12210051/
• 关键词: ポリグルタミン病; 遺伝性脊髄小脳変性症; SCA17; TATA結合蛋白; 痴呆; 小脳症状; パーキンソニズム; 核内封入体

遺伝子未同定の遺伝性脊髄小脳変性症患者のリンパ球をポリグルタミン鎖を強く認識するモノクローナル抗体(1C2抗体)を用いてWestern blotを行い、新規ポリグルタミン蛋白の有無を検討し、1例のリンパ球から分子量約50kDaの新規のポリグルタミン蛋白を発見した。この50kDaの蛋白はTATA結合蛋白(TBP)に対する抗体と反応し、またPCRにてTBP遺伝子のCAG部分が伸長していたことから、新規のポリグルタミン蛋白と思われた。TBP遺伝子のCAGリピート数を当科遺伝子バンクの小脳症状、パーキンソニズム、舞踏病等の不随意運動を有する症例317例、健常者58例にて検討した。正常者のCAGリピート数は29-42であった。一方遺伝性神経疾患を持つ患者群からは43-55リピートを持つアレルが7家系11名に認められた。43リピート以上のアレルをもつ患者臨床像は比較的均一で、発症年齢(平均発症年齢31.8歳)とCAGリピート数は強い負の相関関係が認められ,神経症状は痴呆,小脳症状,錐体外路症状(パーキンソニズム,ジストニア、コレア),腱反射亢進であった。家系構成員のTATA結合蛋白遺伝子中のCAG/CAA多型を検討したところ、発症者は必ず病的アレルのheterozygoteであり、正常者は正常アレルのhomozygoteあるいはheterozygoteであったことから、遺伝形式は常染色体優性遺伝と結論した。剖検脳の免疫組織化学的検討では1C2抗体および抗ユビキチン抗体にて陽性の核内凝集体を認めた。以上の結果より、我々が見出した7家系は、ひとつの疾患単位を形成しており、ポリグルタミン病の範疇に入るものと考えた。

使用单克隆抗体（1C2抗体）进行了遗传不明的脊椎病变性患者的淋巴细胞，该单克隆抗体（1C2抗体）强烈识别多谷氨酰胺链，并研究了一种新型的多谷氨酰胺蛋白，并研究了一种新型的多谷氨酰胺蛋白，并与新型的多谷氨酸蛋白一起使用了近似于多谷氨酸的蛋白质。这种50KDA蛋白与针对TATA结合蛋白（TBP）的抗体反应，TBP基因的CAG部分通过PCR扩展，使其似乎是一种新型的多谷氨酰胺蛋白。在317例病例中检查了TBP基因中的CAG重复次数的数量，还有58例健康运动的健康患者，例如小脑症状，帕金森氏症和唱片。普通人中的CAG重复次数为29-42。另一方面，发现来自七个家庭的11人患有遗传神经系统疾病患者的等位基因43-55。 The clinical picture of patients with alleles of 43 or more repeats was relatively uniform, with a strong negative correlation between the age of onset (average age of onset 31.8 years) and the number of CAG repeats, and neurological symptoms were dementia, cerebellar symptoms, extrapyramidal symptoms (parkinsonism, dystonia, chorea), and hypertension of tendon reflexes.当我们检查家族成员的TATA结合蛋白基因中的CAG/CAA多态性时，我们得出的结论是，遗传形式是常染色体显性的，因为该疾病的开始始终是病理等位基因等位基因杂合子，而正常人则是正常的或杂氮的，因此我们结束了遗传学的统治。在对尸检大脑的免疫组织化学研究中，发现了1C2和抗泛素抗体的阳性核聚集体。基于上述结果，我们认为我们发现的七个家庭形成了一个疾病单位并属于聚谷氨酰胺疾病的类别。

项目成果

Hazeki N,Nakamura K,Goto J, et al.: "Rapid aggregate formation of the huntingtin N-terminal fragment carrying an expanded polyglutamine tract."Biochem Biophys Res Commun. 256・2. 361-366 (1999)

Hazeki N、Nakamura K、Goto J 等人：“携带扩展的聚谷氨酰胺束的亨廷顿蛋白 N 末端片段的快速聚集”。Biochem Biophys Res Commun. 256·2 (1999)。

中村浩一郎: "遺伝性神経変性疾患の病態-遺伝子異常の同定により病態メカニズムは解明されたか-"内科(南江堂,東京). 83・2. 307-310 (1999)

Koichiro Nakamura：“遗传性神经退行性疾病的病理学 - 是否通过遗传异常的鉴定阐明了病理机制？”（Nankodo，东京）83·2（1999）。

羽関典子,中村浩一郎: "ポリグルタミン病の神経細胞死における核内封入体、カスパーゼ、分子シャペロンの役割"脳の科学. 22巻. 873-878 (2000)

Noriko Uzeki、Koichiro Nakamura：“核内含物、半胱天冬酶和分子伴侣在多谷氨酰胺疾病中神经元细胞死亡中的作用”《脑科学》第 22 卷，873-878 (2000)。