リン脂質代謝酵素による神経突起形成と伸長の制御

磷脂代谢酶控制神经突形成和生长

基本信息

批准号：
12053282
负责人：
金保安則
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

リン脂質代謝酵素のホスファチジルイノシトール4-リン酸5-キナーゼや(PIP5K)とホスホリパーゼD(PLD)の神経突起伸長と退縮機構への関与について培養細胞を用いて解析した結果、以下のことが明らかとなった。PIP5Kαをマウス神経芽細胞腫N1E-115細胞に強制発現させると、血清除去による神経突起の形成・伸長が阻害され、球形を保持していた。PIP5Kαのキナーゼ欠失型変異体(D266A)を強制発現させると、血清存在下で培養しているにもかかわらず非常に長い神経突起が形成された。さらに、N1E-115細胞において形成された神経突起はリゾホスファチジン酸(LPA)刺激により退縮するが、D266AはLPAによる神経突起の退縮を阻害した。従来より、低分子量G蛋白質のRhoAとそのターゲットであるROCK(Rho kinase)は神経突起の退縮において重要な役割を果たしていることが知られているが、D266AはROCKによる神経突起の退縮を阻害した。これらの結果から、PIP5Kαは神経突起退縮シグナリングにおいてRhoA/ROCKの下流因子として機能していることが示唆される。一方、PLDアイソザイムの発現誘導可能なクロム親和性細胞腫PC12細胞において、PLD2を発現させると上皮増殖因子(NGF)による神経突起の形成は非常に顕著に促進された。また、NGFによる神経突起の形成・伸長は、PLD2の活性欠失型変異体の発現およびPLDによるホスファチジン酸の産生を抑制する1-butanolにより阻害された。これらの知見から、PLD2は神経突起の形成・伸長において重要な役割を果たすことが結論づけられる。

以下是使用培养细胞对磷脂二磷酸5-激酶和磷脂酶D（PLD）的磷脂酰磷脂代谢酶的磷脂酶D（PLD）D（PLD）的分析。当PIP5Kα被强行表达在小鼠神经母细胞瘤N1E-115细胞中时，抑制了通过去除血清来形成和延伸神经突起的形成和延伸，并保持球形形式。尽管在血清存在下培养了培养，但还是强行表达了丢失型突变体（D266a）的丢失的型丢失的型突变体（D266a）。此外，在N1E-115细胞中形成的神经突起通过刺激RESHOS磷脂酸（LPA）恢复活力，但D266a抑制了LPA神经突出的言辞。众所周知，RhoA（Rho激酶）是一种低分子量G蛋白及其靶标，在神经突起的修辞中起着重要作用，但D266A抑制了岩石神经prot的覆盖率。这些结果表明，PIP5Kα在神经伸出的信号传导中起RhoA/岩石的下游因子。另一方面，在可以诱导和诱导PLD同工酶的铬亲和细胞PC12细胞中，上皮生长因子（NGF）形成神经突起非常突出。另外，1-丁醇抑制了NGF神经突出的形成和延伸，这抑制了PLD2中已删除的突变体的产生，PLD抑制了磷脂酸的产生。这些知识得出的结论是，PLD2在神经突起的形成和生长中起着重要作用。