リン脂質代謝酵素による細胞運動の制御機構

磷脂代谢酶控制细胞运动的机制

基本信息

批准号：
15024270
负责人：
金保安則
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

がん細胞における細胞運動の異常な亢進は、がん細胞の浸潤・転移能の獲得に大きく寄与している。申請者は、がん細胞の浸潤・転移機構を理解するために、細胞運動に必須の構造体であるラッフル膜の形成機構の解析を行っている。これまでに、HeLa細胞を用いて、ホスファチジルイノシトール4-リン酸5-キナーゼ(PIP5K)αは低分子量G蛋白質のARF6により活性化され、このARF6→PIP5Kαシグナリングは上皮増殖因子(EGF)刺激によるラッフル膜形成に関与する可能性を示唆した。しかしながら、これらの研究結果は過剰発現系で得られたものであり、この仮説が正しいか否かをさらに解析して検証する必要がある。また、PIP5KとARFにはそれぞれ6種および3種のアイソザイムが存在し、生理的にこれらの分子のどのアイソザイムがラッフル膜形成に関与しているかを解明することも今後の課題として残されている。これらの問題点を解決するために、申請者は、ARFとPIP5Kの各アイソザイムのノックアウトマウスを作製してそれを利用して解析することを目指している。今年度はARF6とPIP5Kαの遺伝子ノックアウトマウスを作製し、それぞれのマウスから調製した繊維芽細胞を用いて検討した。その結果、これらのノックアウトマウス由来の細胞におけるラッフル膜形成は野生型マウス由来の細胞と同程度であり、これらの分子のラッフル膜形成への関与は否定される可能性が高い。これらの結果は、上述したHeLa細胞を用いた研究結果と矛盾している。これらのことから、ARF6とPIP5Kα以外のアイソザイムがラッフル膜形成に関与している可能性が考えられ、現在この点についての解析を進めている。

癌细胞中细胞运动的异常增强极大地有助于获取癌细胞的侵袭和转移。申请人分析抽奖膜是细胞运动必不可少的结构，以了解癌细胞的侵袭和过渡机制。迄今为止，Hosfatidyl Inochitol 4-磷酸5-磷酸（PIP5K）α通过低分子量G蛋白的ARF6使用，并且该ARF6→PIP5Kα信号是由于上皮生长因子（EGF）刺激而引起的建议它可能参与膜形成。但是，这些研究结果是通过过度表达获得的，有必要进一步分析和验证该假设是否正确。此外，PIP5K和ARF分别具有6种类型的眼睛 - gym，这也是未来的问题，旨在阐明这些分子的这些分子是否参与抽奖膜的形成。为了解决这些问题，申请人旨在为每个ARF和PIP5K同工酶创建和分析敲除鼠标。今年，制备了ARF6和PIP5Kα的基因敲除小鼠，并检查了每只小鼠制备的成纤维细胞。结果，这些基因敲除小鼠细胞中的抽奖膜形成等于源自野生小鼠的细胞，并且这些分子参与在抽奖膜中形成很可能会被否认。这些结果与上述HELA细胞的结果不一致。从这些事实来看，可以想象的是，ARF6和PIP5Kα以外的其他索萨菌参与了抽奖膜的形成，我们目前正在分析这一点。