神経系細胞の多様性を決定する遺伝子発現調節領域の系統的探索法の開発

开发确定神经系统细胞多样性的基因表达调控区的系统搜索方法

基本信息

批准号：
11170255
负责人：
有賀純
金额：
$ 3.97万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の主題は効率的な神経系細胞の多様性に関わる遺伝子発現調節領域探索法ならびに発現系の開発である。平成12年度は、組織特異的あるいは細胞系譜特異的な調節に関わるエンハンサーエレメントの探索法の開発に取り組んだ。その結果、新規エンハンサーエレメントの単離、合成プロモーターの開発、既知のエンハンサーの集積(エンハンサーパネル)を用いた神経系のエンハンサーについての横断的解析システムの確立を行うことができた。現在までに報告されている神経系細胞で組織ないし細胞型特異性をを持つプロモーター、エンハンサーは50以上におよぶ。本研究ではこれらを新規エンハンサー開発のための構築ないし比較材料として利用するため、できる限り多くのものを収集し、比較検討できるように共通のレポーターベクターに組み込んだ。これらのプロモーター、エンハンサーの発現特異性、発現強度をもとにした系統的解析においては、10種以上の培養神経系細胞株並びに対象となる非神経系の細胞株(神経系細胞株パネル)を用いた。エンハンサーパネルと神経系細胞株パネルの組み合わせにより得られた情報をもとに、新規エンハンサーエレメントの評価をおこなう。これまでに、神経系で特徴的な発現を示す遺伝子のBACないしファージクローンをのDNAを材料として探索を進めてきた。今後はこれらの成果をもとに、トランスジェニックマウスによる新規エンハンサーエレメントの評価、複数のCre発現系統の作製を行う。また、整理されたエンハンサーエレメントのデータベースを一般に公開できるように準備を進める。

这项研究的主题是与神经系统细胞多样性相关的基因配方调整区域搜索和表达系统的发展。在2000财年，我们致力于开发与组织特异性或细胞家谱特殊调整有关的增强子错误勘探方法。结果，使用新的增强子元件，合成启动子的开发和已知增强子（增强器面板）的神经系统增强子的横切分析系统。迄今为止，据报道的神经细胞超过50，是具有细胞类型特异性的启动子和启动子。在这项研究中，将这些收集并纳入一个共同的记者矢量中，以便可以收集到尽可能多的新增强剂开发的比较材料。在基于这些启动子的表达特异性的系统分析中，增强子的表达特异性以及表达的强度，超过10种类型的培养神经系统细胞共享和非损伤细胞（神经系统细胞库存面板）使用了它。根据增强剂面板和神经系统细胞库存面板的组合获得的信息，我们评估了新的增强剂时代。到目前为止，它一直在探索基因的DNA，该基因表明神经系统中的特征表达是一种材料。将来，基于这些结果，我们将使用转基因小鼠评估新的增强子错误，并创建多个CRE表达系统。此外，我们将准备，以便可以向公众开放有组织的增强元素的数据库。