がん細胞のアポトーシス誘導を指標としたアンチセンス治療法の開発

以癌细胞凋亡诱导为指标的反义疗法的开发

• 批准号: 11140221
• 负责人: 前川 平
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11140221/
• 关键词: アンチセンス; アポトーシス; がん細胞

アンチセンス・オリゴヌクレオチド(AS ODN)を用いて白血病細胞、血液細胞および慢性関節リウマチ患者から得た滑膜細胞の増殖抑制とその機序を検討し、以下の諸点を明らかにした。(1)AS ODNの5'端および3'端の両端から3塩基間の2つの化学結合をホスホロチオエート型結合とし、中央の塩基の化学結合をホスホジエステル型としたキメラ型分子の合成方法、精製方法を確立し、このキメラ型分子が、すべての塩基間結合がホスホロチオエート型結合の核酸分子と同様、ヌクレアーゼによる分解に耐性であること。また、非特異的に蛋白質と結合したり、Bリンパ球を非特異的に刺激するなどの非特異的作用や非アンチセンス作用を示す程度が少ないこと。(2)c-myc AS ODNでc-mycの発現を低下させると白血病細胞株HL60の増殖が抑制され、さらにその状態からc-mycの発現を急に増強させると、G1/S期境界の細胞が選択的に、かつ大量にアポトーシスをおこすこと。(3)慢性関節リウマチで増殖する滑膜細胞にc-mycアンチセンス核酸分子を導入したところ、Fas/Fas ligandを介したアポトーシスが誘導されること。(4)キメラ型骨格をもったBcl-2,c-myc,EPOレセプター,SDF-1に対するAS ODNが有効な機能を有していること。とくに、EPOレセプターに対するAS ODNをもちいて赤芽球系細胞においてEPOが自己産生されることを見い出した。

反义寡核苷酸（AS ODN）用于研究从白血病细胞，血细胞和类风湿关节炎患者获得的滑膜细胞增殖的抑制及其生长机制，并阐明了以下几点。 （1）我们已经建立了一种合成和纯化嵌合分子的方法，其中从AS ODN的5'和3'末端的三个底部的三个碱基之间的两个化学键是磷酸座型型键，而中心碱基的化学键是磷酸二磷酸酯型。该嵌合分子必须抗核酸酶的降解，就像具有磷酸胸酯型键的核酸分子一样。此外，表现出非特异性或非抗义作用（例如与蛋白质非特异性结合或非特异性刺激B淋巴细胞）不足。 （2）用C-MYC降低C-MYC的表达，因为ODN抑制了白血病细胞系HL60的增殖，如果C-MYC表达突然从该状态突然增加，则选择性地和大量凋亡中的G1/S相边界的细胞。 （3）当C-Myc抗义核酸分子被引入滑膜细胞中，在类风湿关节炎中增殖时，诱导通过FAS/FAS配体的凋亡。 （4）作为Bcl-2，C-MYC，EPO受体和SDF-1的ODN，具有嵌合骨骼的ODN必须具有有效的功能。特别是，我们发现EPO是在红细胞细胞中自生产的，其对EPO受体的ODN。

项目成果

Machida, U.: "The effect of G-CSF administration to healthy donors before bone marrow harvesting"Brit. J. Haematol.. (印刷中).

Machida, U.：“在骨髓采集前给予健康捐献者 G-CSF 的效果”Brit. J. Haematol..（出版中）。

Ishii, T.: "Expression of stromal cell-derived factor-1/pre-B cell growth-stimulating factor receptor, CXC chemokine receptor 4, on CD34+ …"J. Immunol.. 163. 3612-3620 (1999)

Ishii, T.：“基质细胞衍生因子 1/前 B 细胞生长刺激因子受体、CXC 趋化因子受体 4 在 CD34+ 上的表达……”J.Immunol.. 163. 3612-3620 (1999)

Sato, T.: "Erythroid progenitors differentiate and maturate in response to endogenous erythropoietin"J. Clin. Invest.. (印刷中).

Sato, T.：“红细胞祖细胞因内源性促红细胞生成素而分化和成熟”，J. Clin Invest..（出版中）。

Hashiramoto, A.: "C-myc antisense oligodeoxynucleotides can induce apoptosis and down-regulate Fas expression in rheumatoid synoviocytes"Arthritis Rheum.. 42. 954-962 (1999)

Hashiramoto, A.：“C-myc 反义寡脱氧核苷酸可诱导类风湿性滑膜细胞凋亡并下调 Fas 表达”Arthritis Rheum.. 42. 954-962 (1999)