水晶発振子を用いるバイオターゲッティングの定量的評価

使用晶体振荡器对生物靶向进行定量评估

• 批准号: 11132215
• 负责人: 岡畑 恵雄
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11132215/
• 关键词: 水晶発振子; DNA二本鎖; 分子認識; bZIPペプチド; ポリメラーゼ

本研究は、マイクロバランスとして知られる水晶発振子上にDNAを固定化し、ポリメラーゼや転写因子などのたんぱく質がDNA鎖の塩基配列を認識して結合する過程を振動数変化から定量することを目的として行い、以下の成果を得た。水晶発振子の表面に50bpのDNA二本鎖を固定化し、bZIPペプチドがATTC鎖を特異的に認識して結合し、その結合定数は10^8M^<-1>と大変大きいことを明らかにした。さらにポリメラーゼが二本鎖に結合してDNA鎖を重合していく過程も追跡できた。

这项研究的目的是将 DNA 固定在称为微天平的晶体振荡器上，并根据频率的变化来量化聚合酶和转录因子等蛋白质识别并结合 DNA 链碱基序列的过程。获得。我们将50bp的DNA双链固定在晶体振荡器的表面，发现bZIP肽特异性识别并结合ATTC链，结合常数高达10^8M^-1。他们还能够追踪聚合酶与双链结合并聚合 DNA 链的过程。

项目成果

Y. Okahata, Y. Masunaga, H. Matsuno, and H. Furusawa: "Quantitative detection of a DNA ligase reaction on a quartz-crystal microbalance"Nucleic Acids Symposium Ser.. 42. 147-148 (1999)

Y. Okahata、Y. Masunaga、H. Matsuno 和 H. Furusawa：“石英晶体微天平上 DNA 连接酶反应的定量检测”核酸研讨会系列.. 42. 147-148 (1999)

K. Niikura, H. Matsuno, and Y. Okahata: "Binding Behaviors of Lysine-containing Helical Peptides to DNA Duplexes immobilized on a 27 MHz Quartz-Crystal Microbalance"Chem. Eur. J.. 5. 1609-1616 (1999)

K. Niikura、H. Matsuno 和 Y. Okahata：“含赖氨酸的螺旋肽与固定在 27 MHz 石英晶体微天平上的 DNA 双链体的结合行为”Chem。