移植片対宿主病(GVHD)に関わるマイナー組織適合抗原の同定

移植物抗宿主病 (GVHD) 中涉及的次要组织相容性抗原的鉴定

• 批准号: 10877162
• 负责人: 河上 裕
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877162/
• 关键词: マイナー組織; T細胞; 同種骨髄移植; GVHD(graft versus host disease); GVL(graft versus leukemia); 白血病; 免疫療法; cDNA発現クローニング; マイナー組織適合抗原; GVH; GVL; 骨髄移植

近年、GVHやGVL反応に関与するマイナー組織適合抗原に対する同種免疫反応が、ドナーリンパ球輸注やミニ移植として、白血病の治療に応用されつつある。本研究では、その同種反応の細胞・分子レベルでの解明をめざした。平成11年度は、前年度に引き続いて、平成11年2月から7月までに施行された同種骨髄移植例12例を合わせて、合計14例のMHCマッチ同種骨髄移植を施行した患者(急性骨髄性自血病、急性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、多発性骨髄腫、再生不良性貧血)において、同種抗原特異的T細胞を誘導を試み、その性質を解析した。移植後に生着したドナー由来の患者末梢血リンパ球から、移植前の患者血液細胞の同種抗原に特異的に反応するT細胞の誘導を試みた。具体的には、移植後の患者から得た末梢血リンパ球を、移植前に得た患者末梢血単核球、あるいは、そこから樹立したEpstein BarrウイルストランスフォームB細胞株(EBV-B)でin vitroで頻回刺激することにより、14例中4例(29%)に元の患者EBV-BあるいはPHAブラストを選択的に認識して、サイトカインを分泌したり、細胞傷害を起こすT細胞が誘導された。インターフェロンγ分泌試験の結果と細胞傷害試験の結果は相関した。同種抗原反応性T細胞の誘導率が米国での成績よりも低率であったが、米国に較べて、日本人が均質であることが一つの要因となる可能性がある。T細胞が誘導できた4例中、2例はCD8+T細胞であり、2例はCD4+T細胞であった。CD4+T細胞は抗HLA抗体を用いた阻害実験により、1つはHLA-DRとDP拘束性、もう1つはHLA-DQ拘束性であることを明らかにした。今後、cDNA発現クローニング法を用いて、これらT細胞が認識する同種抗原を単離して、そのGVHやGVLへの関与を検討する予定である。

近年来，针对参与 GVH 和 GVL 反应的次要组织相容性抗原的同种免疫反应已通过供体淋巴细胞输注和小型移植应用于白血病的治疗。在这项研究中，我们的目的是在细胞和分子水平上阐明这种均相反应。继上一年之后，1999财年，共有14名患者接受了MHC匹配的同种异体骨髓移植（急性骨髓移植）。我们尝试在自身血液病、急性淋巴细胞白血病、慢性粒细胞白血病、多发性骨髓瘤和再生障碍性贫血。我们尝试从移植后存活的供体来源的患者外周血淋巴细胞中诱导出在移植前与患者血细胞的同种异体抗原发生特异性反应的 T 细胞。具体地，使用从移植后的患者获得的外周血淋巴细胞和移植前获得的患者外周血单核细胞，或由其建立的EB病毒转化的B细胞系(EBV-B)，通过在体外重复刺激4种。 14名患者（29%）产生了选择性识别原始患者的EBV-B或PHA母细胞、分泌细胞因子并引起细胞毒性的T细胞。干扰素γ分泌试验和细胞毒性试验的结果具有相关性。同种异体抗原反应性 T 细胞的诱导率低于美国的结果，但因素之一可能是日本人群比美国人群更加同质。在可诱导 T 细胞的 4 例中，2 例为 CD8+ T 细胞，2 例为 CD4+ T 细胞。使用抗 HLA 抗体的抑制实验表明，CD4+ T 细胞是 HLA-DR 和 DP 限制性的，以及 HLA-DQ 限制性的。未来，我们计划使用cDNA表达克隆来分离这些T细胞识别的同种抗原，并检查它们在GVH和GVL中的参与情况。