マラリアのワクチン開発を目指した,BCGからのSERA抗原発現の試み

尝试从卡介苗中表达 SERA 抗原，旨在开发疟疾疫苗

基本信息

批准号：
10166218
负责人：
山田毅
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10166218/
关键词：
マラリアワクチン組み換えBCG

项目摘要

マラリアワクチン開発で,最も障害となっているのがアジュバントの問題である.動物実験等で,防御効果が確認されている抗原を,実際にヒトに投与するには,安全性と有効性を兼ね備えたアジュバントが必要であるが,未だ十分なものが無い.我々は熱帯医学研究所神原廣二教授との共同研究で,組み換えBCGのシステムを用いて,マウスを用いた赤内型マラリア原虫感染防御に成功し,その防御機構が,細胞性免疫をベースにした防御抗体産生誘導であることを,数年にわたる解析の結果,明らかにし,本年発表した(J.Exp.Med.,1998).さらに,BCGシステムを,ヒトに応用するため,熱帯熱マラリアの防御抗原SERAをα抗原をキャリアーとしてBCGから発現させることを試みた.SERAをコードする合成遺伝子をα抗原遺伝子の様々な場所に挿入し,合計7種類の組み換えBCGを作製した.それらを,試験管内で培養し,分泌抗原中の蛋白質を解析してきたが,現在までの所,十分量のSERA抗原を発現する,組み換えBCG菌は得られていない.この原因は,1;発現させるのにSERAの分子量が大きすぎる,2;SERA抗原の一定部位が分泌に適さない(不溶体を形成する),3;使用コドンの不適合,4;プロモーター活性が低い等の原因が考えられた.現在1,2の原因を解決すべく,SERA遺伝子を分割して,発現させることを試みている.また,α抗原以外のキャリアー蛋白質の検討を行い,抗体産生能の高いMDP1等の抗原とSERAの融合蛋白質を発現させる,プラスミッドを構築している.

疟疾疫苗发育的最大障碍是佐剂的问题。为了实际管理已确认对动物等具有保护作用的抗原，以实际对人类进行抗原，安全性和功效是必要的，但仍然没有足够的抗原。在热带医学研究所的Kanbara Hiroji教授的联合研究中，我们使用重组BCG系统成功地保护了使用小鼠的疟疾感染，经过几年的分析，揭示了防御机制是诱导基于细胞介导的免疫力的保护性抗体生产，并在本年度诱导了基于保护的保护性抗体生产，并在本年度出版。此外，为了将BCG系统应用于人类，我们尝试使用α抗原作为载体来表达BCG的保护性抗原血清。血清使用α抗原从BCG表达保护性抗原血清。血清用于使用α抗原作为载体来表达BCG的保护性抗原血清。血清用于从BCG表达保护性抗原血清。将要使用的合成基因插入到α-抗原基因的各个位置中，总共产生了七种重组BCG。它们在体外培养以分析分泌的抗原中的蛋白质，但迄今为止，尚未获得重组BCG细菌表达足够数量的血清抗原。原因被认为是1；血清的分子量太大而无法表达，2；血清抗原的某个部位不适合分泌（不公开形式），3；密码子的不兼容，4;低启动子活性。目前，为了解决1和2的原因，我们正在尝试分裂和表达血清基因。我们还研究了除α-抗原以外的载体蛋白，并构建了一种表达具有高抗体生产能力的抗原的质粒，该质粒表达了抗原（例如MDP1）。