DNA二本鎖切断の際に染色体末端で形成されるエンドジョイニング複合体の構造と機能

DNA双链断裂过程中染色体末端形成的末端连接复合物的结构和功能

基本信息

批准号：
10159204
负责人：
池田日出男
金额：
$ 1.34万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は、DNA二本鎖切断によって形成されるDNA末端のエンドジョイニングの際に形成されるDNA-蛋白質複合体に含まれる因子を探索する目的で解析を行い、ヒストンH4やヒストンアセチル化酵素Nat1-Ard1が、DNAのエンドジョイニングに働き、その機構を通して欠失変異を引き起こす非相同的組換えや修復に関与していることを明らかにした。これらの結果を基にして、DNAの末端が凝縮してヘテロクロマチン様の構造を形成するというモデルを提唱した。さらに、出芽酵母Sgs1ヘリケースが相同的組換えを介して非相同的組換えを抑制することを明らかにした。さらに、出芽酵母Sgs1ヘリケース遺伝子をBLM及びWRNへリケース遺伝子と置き換えた酵母株を作成して、酵母細胞内でのBLM及びWRNヘリケースの働きを調べ、BLM及びWRNヘリケースが酵母において相同的組換えを介して非相同的組換えを抑制することを示した。次に、姉妹染色体をつなぐ役割をするcohesinに関わる因子を明らかにする目的で、分裂酵母Rad21pと相互作用する因子をtwo-hybrid systemを用いて探索した。その結果、分裂酵母の新規遺伝子toil^+を単離した。toil^+遺伝子の解析の結果、toil^+が細胞のM期から間期への移行に必須であることを示した。またtoil^+と遺伝学的に相互作用する遺伝子として分裂酵母のRanGTPaseであるspil^+が単離されたことから、toil^+がRanGTPase systemに働くことが強く示唆された。

我们分析了由DNA双链切割，Histon H4和Histon乙酰化酶Nat1形成的DNA末端中所包含的因子。通过其机制引起缺失突变的恢复。基于这些结果，提出了一个模型，其中将DNA的末端凝结成形成杂质素的结构。此外，已经揭示了口香糖酵母SGS1解旋酶通过同源重组抑制非耶和华的重组。此外，在酵母菌中，将酵母酵母SGS1旋转酶基因替换为re -case基因到BLM和WRN，研究了酵母中Blm和WRN旋转酶的功能，而BLM和WRN Heri病例在酵母中的重新组合在酵母中的重组它被证明可以抑制非耶和华的重组。接下来，我们搜索了与分裂的酵母Rad21p相互作用的因素，以阐明与粘蛋白相关的因素，这些因素在连接姐妹染色体方面发挥了作用。结果，分离了裂缝酵母的新基因劳动^+。对玩具^+基因分析的分析表明，Toyil^+对于从M期M期的细胞过渡至关重要。同样，由于Spil^+，因此建议玩具^+适用于rangtpase System，因此与辛苦^+相互作用的Spil^+spil^+。