黄色ブドウ球菌のロイコシジン及びガンマヘモリジンの血球崩壊機構の解明

阐明金黄色葡萄球菌杀白细胞素和γ溶血素的血细胞分解机制

基本信息

批准号：
08660086
负责人：
神尾好是
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

黄色ブドウ球菌の白血球崩壊毒素ロイコシジンおよび赤血球崩壊毒素ガンマヘモリジンは、それぞれ二成分蛋白質(LukFとLukS)及び(HγIとHγII)から構成され、それぞれの毒素活性発現には各々二成分が必須である。LukF成分とHγI成分は両毒素において共通成分として存在し、またLukS及びHγII成分は、血球認識に携わる蛋白質であることを明らかにした。LukS/HγIIキメラ成分の解析から、ガンマヘモリジン活性には、HγII成分のN末端からArg57までの領域(MHLS 5)が必須であることが判明した。そこで、この領域における両成分の相違アミノ酸配列/残基をLukS成分に導入し特異的最小必須領域の同定を行った。HγII成分のN末端からArg57までの57アミノ酸必須領域とLukS成分におけるN末端相同領域との比較から、HγII成分のIle27〜Asp35の領域に存在するα-ヘリックス構造に注目した。そして、IV領域はこのα-ヘリックス領域のすぐ上流域に存在しているので、MLS-IVの二次構造を推定したところ、Asp18〜Thr20間のα-ヘリックス構造は形成されたが、Ile27〜Asp35間のα-ヘリックス構造は形成されなかった。しかしながら、Ala26-Ile27を加えたIV'領域を導入したMLS-IV'ではHγII成分に見られる2つのα-ヘリックス構造が再現された。そこで、MLS-IV'を解析した。MLS-IV'の精製標品を用いて、解析を行った結果、ガンマヘモリジン活性はHγII成分を100とした相対溶血活性でMHLS5、MLS-IV'それぞれ,205、102であった。これらの結果より、HγII成分のIV'領域(K23RLAI27)が、ガンマヘモリジン活性に必須であることが判明した。またAsp18〜Thr20間及びIle27〜Asp35間の2つのα-ヘリックス領域が、ガンマヘモリジン活性に重要であること示唆された。

杀白细胞素（金黄色葡萄球菌的一种白细胞溶解毒素）和 γ 溶血素（一种红细胞毒素）均由两种成分蛋白（LukF 和 LukS）和（HγI 和 HγII）组成，这两种成分中的每一种对于其各自的表达都是必需的。毒素活动。结果表明，LukF和HγI成分是两种毒素的共同成分，LukS和HγII成分是参与血细胞识别的蛋白质。对 LukS/HγII 嵌合体成分的分析表明，从 HγII 成分的 N 末端到 Arg57 (MHLS 5) 的区域对于 γ 溶血素活性至关重要。因此，我们将该区域中两个组分的不同氨基酸序列/残基引入LukS组分中，并鉴定了特定的最小必需区域。通过将HγII成分的N端至Arg57的57个氨基酸必需区域与LukS成分的N端同源区域进行比较，我们重点关注HγII的Ile27至Asp35区域中存在的α螺旋结构成分。由于 IV 区域紧邻该 α 螺旋区域的上游，因此我们估计了 MLS-IV 的二级结构，发现在 Asp18 和 Thr20 之间形成了 α 螺旋结构，但在 Ile27 和 Asp35 之间形成了 α 螺旋结构。没有形成。然而，在引入了包含Ala26-Ile27的IV'区域的MLS-IV'中，再现了在HγII成分中看到的两个α螺旋结构。因此，我们分析了MLS-IV'。使用MLS-IV'的纯化制剂进行分析的结果，以HγII成分为100时的相对溶血活性，γ溶血素活性分别为205和102。这些结果表明，HγII 成分的 IV' 区 (K23RLAI27) 对于 γ 溶血素活性至关重要。还表明 Asp18 和 Thr20 之间以及 Ile27 和 Asp35 之间的两个 α 螺旋区域对于 γ 溶血素活性很重要。