急性前骨髄球性白血病の15;17転座における染色体転座形成分子機構の研究

急性早幼粒细胞白血病15;17易位染色体易位形成的分子机制研究

• 批准号: 06770561
• 负责人: 田代 聡
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770561/
• 关键词: APL; 15;17転座; ERR

本研究では、我々が新たに見いだした急性前骨髄球性白血病に特異的に認められる15;17転座の17番染色体側切断点集中領域ERR(レチノイン酸受容体α遺伝子内)を用いたin vitro transfection法によるERRのDNA再構成活性の検討を行った。その結果、NIH3T3細胞ではERRが他の領域と比較してDNA再構成活性が高いことがあきらかとなった。また、DNA再構成部位が48塩基対のERR領域内のさらに20塩基対内に収束することも明らかとなった。次いでERRを用いたゲルシフト法によるERR特異的結合蛋白質の検討を行ったところ、in vitro transfection法に用いたNIH3T3細胞にはERR特異的結合蛋白質が存在することが明らかとなった。また、この蛋白質はNIH3T3細胞では増殖期より増殖停止期においてより多く発現されていることも明らかとした。NIH3T3細胞以外にヒト白血病細胞株においてERR特異的結合蛋白質の有無を検討したところ、急性リンパ性白血病由来細胞株の一部において同蛋白質の存在が確認された。また、マウスの脳、胸腺、脾臓、肝臓、精巣各組織での検討では、脳組織におけるERR特異的結合蛋白質の存在が確認された。これらのERR特異的結合蛋白質は電気泳動パターンより複数存在することが示唆され、現在種々の細胞株を用いて更に詳細な検討を行っている。また同時にERRのDNA結合蛋白質との結合に必須な部位をメチレーション阻害法を用いて検討している。

在这项研究中，我们使用体外转染方法使用了15; 17易位的17侧断裂点浓度区域，特别是在急性前临床前白血病中研究了ERR的DNA重排活性。结果，很明显，在NIH3T3细胞中，错误的DNA重排活性高于其他区域。还揭示了DNA重建位点在48个碱基对ERR区域内的另外20个碱基对内收敛。接下来，我们通过使用ERR进行了凝胶转移研究了异常的结合蛋白，并发现在体外转染方法中使用的NIH3T3细胞中存在异体结合蛋白。还发现，在增殖停滞阶段，该蛋白在NIH3T3细胞中比在增殖阶段更能表达。除NIH3T3细胞外，还研究了人类白血病细胞系中存在或不存在异常结合蛋白，并在源自急性淋巴细胞性白血病的某些细胞系中证实了同一蛋白的存在。此外，在小鼠的大脑，胸腺，脾脏，肝脏和睾丸组织中的研究证实了脑组织中存在异体结合蛋白。建议通过电泳模式有多种异常结合蛋白，目前正在使用各种细胞系进行进一步的详细研究。同时，正在使用甲基化抑制作用研究与ERR的DNA结合蛋白结合的位点。