急性前骨髄球性白血病の15;17転座における染色体転座形成分子機構の研究

急性早幼粒细胞白血病15;17易位染色体易位形成的分子机制研究

• 批准号: 06770561
• 负责人: 田代 聡
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770561/
• 关键词: APL; 15;17転座; ERR

本研究では、我々が新たに見いだした急性前骨髄球性白血病に特異的に認められる15;17転座の17番染色体側切断点集中領域ERR(レチノイン酸受容体α遺伝子内)を用いたin vitro transfection法によるERRのDNA再構成活性の検討を行った。その結果、NIH3T3細胞ではERRが他の領域と比較してDNA再構成活性が高いことがあきらかとなった。また、DNA再構成部位が48塩基対のERR領域内のさらに20塩基対内に収束することも明らかとなった。次いでERRを用いたゲルシフト法によるERR特異的結合蛋白質の検討を行ったところ、in vitro transfection法に用いたNIH3T3細胞にはERR特異的結合蛋白質が存在することが明らかとなった。また、この蛋白質はNIH3T3細胞では増殖期より増殖停止期においてより多く発現されていることも明らかとした。NIH3T3細胞以外にヒト白血病細胞株においてERR特異的結合蛋白質の有無を検討したところ、急性リンパ性白血病由来細胞株の一部において同蛋白質の存在が確認された。また、マウスの脳、胸腺、脾臓、肝臓、精巣各組織での検討では、脳組織におけるERR特異的結合蛋白質の存在が確認された。これらのERR特異的結合蛋白質は電気泳動パターンより複数存在することが示唆され、現在種々の細胞株を用いて更に詳細な検討を行っている。また同時にERRのDNA結合蛋白質との結合に必須な部位をメチレーション阻害法を用いて検討している。

在本研究中，我们利用新发现的位于15;17易位的17号染色​​体断点集中区域的ERR区域（视黄酸受体α基因内），研究了在急性早幼粒细胞白血病中特别观察到的DNA重建活性。使用体外转染方法进行ERR。结果显示，在NIH3T3细胞中，ERR比其他区域具有更高的DNA重排活性。研究还表明，DNA 重排位点汇聚在 48 碱基对 ERR 区域内的另外 20 碱基对内。接下来，我们通过使用ERR的凝胶迁移法研究了ERR特异性结合蛋白，结果表明ERR特异性结合蛋白存在于体外转染法中使用的NIH3T3细胞中。我们还发现，该蛋白在 NIH3T3 细胞中在生长停滞期的表达量高于生长期。当检查 NIH3T3 细胞以外的人白血病细胞系中是否存在 ERR 特异性结合蛋白时，在一些急性淋巴细胞白血病来源的细胞系中证实了相同蛋白的存在。此外，使用小鼠大脑、胸腺、脾脏、肝脏和睾丸组织的研究证实了脑组织中存在 ERR 特异性结合蛋白。电泳模式表明存在多种 ERR 特异性结合蛋白，我们目前正在使用各种细胞系进行更详细的研究。同时，我们正在使用甲基化抑制方法研究 ERR 与 DNA 结合蛋白结合的必要位点。