核内オーファンプロテインネットワークの解明

核孤儿蛋白网络的阐明

基本信息

批准号：
13206056
负责人：
田代聡
金额：
$ 3.46万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13206056/
关键词：
核高次構造核機能可視化 ICD領域

项目摘要

1)GFP-RAD51融合タンパク質の過剰発現により可視化されたICD領域と遺伝子転写部位、複製部位の可視化を行った。その結果、転写部位はICD領域と密接な関連があることが明らかとなった。また、転写部位、複製部位の核内分布には一定の法則があることが示唆されたため、現在海外共同研究者とともにシミュレーションモデルとの比較による検討を行っている。2)紫外線マイクロ照射法および通常のX線照射によるゲノム損傷誘導後のゲノム修復関連タンパク質Rad51およびMre11とssDNA形成部位の空間的、時間的関連を解析により、ゲノム損傷部位ではまずMre11ついでRad51の集積が認められることを明らかにした。また、これらのタンパク質複合体は様々なパターンでssDNA形成部位と共局在を示し、ゲノム修復の多様性が示唆された。現在論文投稿準備中である。また、RAD54Bがヒト細胞においてゲノム修復に関わらないゲノム相同組換えに重要であることを明らかにした。3)転写抑制因子Bach2と転写部位の関連の検討を行った。その結果、酸化ストレス誘導後、Bach2が形成する核内フォーカスがPML bodyと密接な関連を示し、さらにPML body内の遺伝子転写が特異的に抑制されることを明らかにした。現在論文投稿準備中である。特定の転写因子による遺伝子発現調節と核高次構造の関連を明らかにした報告は国内外になく、ポストゲノムにおける核高次構造研究の重要性を示すことができたと考えられる。

1) 我们通过 GFP-RAD51 融合蛋白的过表达来可视化 ICD 区域、基因转录位点和复制位点。结果显示转录位点与ICD区域密切相关。此外，由于有人提出转录位点和复制位点的核分布存在一定的规则，因此我们目前正在与海外合作者通过与模拟模型的比较进行研究。 2)通过紫外线微照射和常规X射线照射诱导基因组损伤后，对基因组修复相关蛋白Rad51和Mre11与ssDNA形成位点之间的时空关系进行分析，发现Mre11和Rad51首先在基因组损伤位点积累。已经明确表示这是可以接受的。此外，这些蛋白质复合物以各种模式与 ssDNA 形成位点共定位，表明基因组修复的多样性。该论文目前正在准备提交。我们还发现，RAD54B 对于不参与人类细胞基因组修复的基因组同源重组很重要。 3）我们研究了转录抑制子Bach2与转录位点之间的关系。结果，我们发现氧化应激诱导后，Bach2形成的核灶与PML体密切相关，并且PML体内的基因转录受到特异性抑制。该论文目前正在准备提交。日本国内外尚无阐明特定转录因子基因表达调控与核高阶结构之间关系的报道，认为本研究能够证明核高阶结构研究在细胞核高阶结构中的重要性。后基因组时代。