核内オーファンプロテインネットワークの解明

核孤儿蛋白网络的阐明

基本信息

批准号：
14014235
负责人：
田代聡
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14014235/
关键词：
核高次構造核機能可視化 ICD領域

项目摘要

1)GFP-RAD51融合タンパク質の過剰発現により可視化された領域は、ICD領域の一部であり、さらに遺伝子転写部位と密接な関連があることが明らかになった。さらに、特定の条件下でGFP-RAD51融合蛋白質が形成するフィラメントが破壊されることが明らかになったため、現在GFP-RAD51と結合し複合体を形成している蛋白質の解析を行っている。2)ゲノム修復蛋白質動態の解析をより効率的に行うため、市販されている紫外線レーザーを装備した共焦点レーザー顕微鏡を用いて紫外線マイクロ照射法を新たに確立したので報告した。3)間期核における染色邸領域配置を解析するための三次元マルチカラーFISH法を確立した。これと関連して、ヒト細胞において染色体の複製標識法を用いることにより、個々の染色体領域は細胞分裂時に再配置されることを明らかにしたので報告した。3)転写抑制因子Bach2と転写部位の関連の検討を行った。その結果、酸化ストレス誘導後、SUMO化されたBach2が形成する核内フォーカスがPML bodyと位置的に密接な関連を示し、さらにPML body内の遺伝子転写が特異的に抑制されることを明らかにした。現在論文投稿中である。現在、Bach2フォーカスに共局在する蛋白質の解析と、リンパ球での内因性Bach2の局在の解析とを進めている。特定の転写因子による遺伝子発現調節と核高次構造の関連を明らかにした報告は国内外になく、ポストゲノムにおける核高次構造研究の重要性を示すことができたと考えられる。

1）据透露，通过GFP-RAD51融合蛋白的过度表达可视化的区域是ICD区域的一部分，与遗传转移位点密切相关。此外，由于已经揭示出形成GFP-RAD51融合蛋白的细丝在某些条件下被破坏，因此目前与GFP-RAD51结合以形成复合物的蛋白质。 2）为了更有效地分析基因组恢复蛋白质动力学，我们报告说，使用配备有市售紫外线激光器的CO -COCUS激光显微镜建立了一种新的紫外线微调方法。 3）建立了用于分析临时核中染色区域排列的三维多颜色鱼方法。关于这一点，据报道，在人类细胞中使用染色体复制方法表明，在细胞分裂时重做了单个染色体区域。 3）检查了与转移抑制因子Bach2和转移位点的关系。结果，很明显，在诱导氧化应激之后，Sumo化的Bach2形成的核聚焦与PML体密切相关，并且PML体内的基因转移特别抑制了。我目前正在发布论文。当前，正在促进淋巴细胞中涵盖Bach2焦点的蛋白质和内源性Bach2的局部分析。没有任何报道阐明特定转录因子与基因表达与核高层结构之间的关系之间的关系，并且认为表明核高级别结构的重要性被指出了。