インスリン様成長因子(IGF)結合タンパク質-1遺伝子の転写制御機構の解析

胰岛素样生长因子（IGF）结合蛋白1基因转录调控机制分析

• 批准号: 06760121
• 负责人: 竹中 麻子
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06760121/
• 关键词: タンパク質栄養; IGFBP-1; HNF-1

インスリン様成長因子結合タンパク質-1(IGFBP-1)は、その肝臓における転写速度およびmRNA量が食餌タンパク質の質や量の低下に伴って著増しており、体タンパク質の代謝制御において重要な役割をはたしていると考えられている因子である。本研究では、栄養状態の低下に伴ってBP-1遺伝子に生じる転写制御機構の変化を解明することを目的として、同遺伝子5′領域に結合するHNF-1(hepatocyte nuclear factor-1)に注目して解析を行った。HNF-1には同じ塩基配列を認識する2種類のサブタイプ(HNF-1α,β)が存在するため、まずIGFBP-1遺伝子に結合する因子の同定およびその栄養状態の変化に対する応答を調べてみた。タンパク質として12%カゼインを含む餌(C)あるいはタンパク質を含まない餌(PF)で飼育したラット肝臓より得た核タンパク質を用いて、IGFBP-1遺伝子の断片をプローブとしてgel shift assayを行ったところ、shiftするバンドの移動度が両群で異なっていた。さらに、この反応液にHNF-1α,βの抗体を加えたところ、いずれの場合にもHNF-1αの抗体のみが結合する因子と反応した。この現象は、プローブDNAとしてHNF-1の結合配列のオリゴヌクレオチドを用いた場合にも再現された。また、同様の系でDNasel footprintを行ったところ、PFの核タンパク質の方がCよりも7bp広い領域をprotectしていた。以上の結果より、タンパク質栄養状態の変化に応答して肝臓中のHNF-1αに何らかの変化が生じて、これがIGFBP-1遺伝子の転写制御に関与している可能性が強く示された。

随着膳食蛋白质质量和数量的减少，肝脏中胰岛素样生长因子结合蛋白-1（IGFBP-1）的转录率和mRNA量显着增加，在调节体内蛋白质代谢中发挥着重要作用。一个被认为起作用的因素。在本研究中，我们重点关注与 BP-1 基因 5' 区域结合的 HNF-1（肝细胞核因子-1），旨在阐明 BP-1 中发生的转录控制机制的变化。因营养状况下降而进行了基因分析。由于HNF-1有两种亚型（HNF-1α和β）识别相同的碱基序列，因此我们首先研究了与IGFBP-1基因结合的因子的鉴定及其对营养状况变化的反应。 。使用从喂食含有 12% 酪蛋白作为蛋白质 (C) 的饮食或不含蛋白质 (PF) 的饮食的大鼠的肝脏中获得的核蛋白，使用 IGFBP-1 基因的片段作为探针，进行凝胶转移测定。两组的移动带移动性不同。另外，在该反应液中添加HNF-1α和β抗体时，均仅HNF-1α抗体与结合因子反应。当使用HNF-1结合序列的寡核苷酸作为探针DNA时，也再现了该现象。此外，当使用类似的系统进行 DNAsel 足迹时，PF 核蛋白保护的区域比 C 蛋白宽 7 bp。上述结果强烈表明，肝脏中的HNF-1α因蛋白质营养状态的变化而发生一些变化，并且这涉及IGFBP-1基因的转录调节。