植物の組織分化と二次代謝産物生産との関係に関する研究

植物组织分化与次生代谢产物产生关系的研究

基本信息

批准号：
05780424
负责人：
山本浩文
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Gifu Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

クララ植物体においてプレニルフラボノイドが根のコルク層に局在していたことから、コルクのプレニルフラボノイド生産に対する役割を明らかにするために、クララ液内振盪培養系にコルク片を添加したところ、生長にはほとんど影響せずに、通常の約3-5倍のプレニルフラボノイドが生産され、その70-80%がコルクに吸着された。培養細胞におけるプレニルフラボノイドの局在部位を明らかにするためにプロトプラストを調製し、そのプレニルフラボノイド含量を測定したところ、残存量は細胞の2-6%程度であったことから、プレニルフラボノイドは細胞壁に蓄積していることが明らかとなった。一方、プレニルフラボノイドの増加の原因としては、1)コルク添加による二次代謝系の活性化、2)のコルクへの吸着による分解からの保護が考えられた。しかしコルク片の構成成分であるcellulose,suberic acidを添加しても生産性の増加は認められず、また培養時にプレニルフラボノイドを投与してもほとんど分解されなかったことから、これらの可能性は否定された。従って、細胞壁に存在し何らかの形で生産系に抑制的に作用していたプレイニルフラボノイドがコルク片に移行した結果、抑制が解除されて生産性が増加したのではないかと考えられた。このことを明らかにするためにプレニルフラボノイド生産の鍵酵素であるプレニルトランスフェラーゼ活性の変動について検討した。基質としてdimethylallyl diphosphyateを合成し、Mg^<2+>およびnarigeninの存在下、クララ培養細胞から抽出した粗酵素溶液とインキュベートしたところ、naringeninより局性の低いフラバノン骨格を有する未知の化合物2つが検出された。現在これらの化合物の構造決定を試みている。

由于为了阐明软木植物在蛋黄酱中的作用，将蛋白基类黄酮定位在clara植物的根软木层中，因此将软木片添加到clara内的摇动培养培养基系统中，对生长的影响很小，大约3-5倍，大约3倍通常产生了通常的蛋白酶类黄酮，并在其上产生了70--80％的corcor and adsorn concorcor。准备原生质体以阐明培养细胞中类类黄酮的定位位点，并测量丙烯基类黄酮的含量，其余量约为细胞的2-6％，表明类类黄酮类药物在细胞壁中累积。另一方面，蛋白酶类黄酮的增加的原因为1）由于加入软木剂而引起的次级代谢系统的激活，以及2）通过吸附到软木的吸附而免受分解的保护。但是，这种可能性被拒绝了，因为纤维素和决定是软木碎片的组成部分，并没有提高生产力，并且由于培养过程中培养期间的类黄酮类动物的施用几乎不会降解。因此，人们认为，存在于细胞壁中并以某种方式抑制生产系统的Preynyl类黄酮已迁移到软木碎片，并提高了抑制作用并提高了生产力。为了澄清这一点，我们研究了前转移酶活性的变化，这是一种用于前产生前氟氟氟氟氟氟此类的关键酶。将二甲基二磷酸二磷酸合成为底物，并与在Mg^<2+>和玉米素存在下从Clara培养细胞中提取的粗酶溶液一起孵育，两种未知化合物具有比纳林宁蛋白更小的黄酮酮骨架。目前，我们正在尝试确定这些化合物的结构。