虚血性神経細胞障害における前シナプス情報伝達系の関与について

突触前信息传递系统参与缺血性神经元损伤

• 批准号: 05770497
• 负责人: 多賀谷 昌史
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Hyogo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770497/
• 关键词: 虚血性脳血管障害; 砂ネズミ; 海馬; 選択的神経細胞死; 分子組織化学; c-src遺伝子; シナプトフィシン

神経細胞の選択的脆弱性メカニズムの解明は虚血性脳血管障害の病態理解に非常に重要と考えられる。本研究では砂ネズミ一過性前脳虚血モデルを用い、海馬CAI選択的神経細胞死における前シナプス側調節因子としてのc-srcの可能性を遺伝子・蛋白質レベルで検討することを目的とした。1)c-src遺伝子産物であるpp60^<c-sro>に対する抗体を用いた免疫組織化学的検討により、海馬におけるpp60^<c-sro>の分布並びに一過性前脳虚血後の経時的変動を明らかとした。pp60^<c-sro>は細胞体・樹状特記を取り囲むようにシナプス終末部に顆粒状に免疫陽性反応として認められ、前シナプス側での局性が示された。5分前脳虚血負荷後、1日で海馬CAI領域のstratum radiatumで免疫反応が強く見られるようになった。3日後には更に顆粒状に反応増強が認められるようになり、7日後にはコントロールの状態に復していた。2)シナプス小胞の構成蛋白質であるシナプトフィシンをマーカーとした免疫組織化学的検討では、海馬においてシナプストフィシンの変動は認められなかった。3)マウスc-src mRNAに対する[^<35>S]標識オリゴヌクレオチドをプローブとして用いたin situ hybrididization histochemistryによる検討では、海馬錐体細胞層及び歯状回顆粒細胞層では前虚血による変化は見られず、嗅内野で一過性にハイブリダイゼーションシグナルの増強が認められ、嗅内野におけるc-src蛋白産生能の亢進が示された。以上より、後シナプス側の障害と考えられている海馬CAI選択的神経細胞死に、c-srcは前シナプス側の調節因子として関わっていることが示唆された。

阐明神经元选择性脆弱性机制对于理解缺血性脑血管疾病的病理非常重要。在这项研究中，我们使用了一种在沙鼠中的瞬时前脑缺血模型，旨在研究C-SRC作为海马CAI选择性神经元死亡的突触前调节剂在基因和蛋白质水平上的可能性。 1）使用对PP60^<c-sro>的抗体（C-SRC基因的产物）的免疫组织化学研究揭示了海马中PP60^<c-Sro>的分布，以及瞬时前脑缺血后的延时变化。发现PP60^<c-sro>是突触末端末端的颗粒状免疫反应，周围是细胞躯体和树突状的，表明突触前一侧的位置。前脑缺血5分钟后，在一天之内，海马CAI区域的辐射层中强烈观察到免疫反应。 3天后，以颗粒形式进一步增强了反应，并在7天后恢复反应以对照。 2）在使用突触噬蛋白的免疫组织化学研究中，突触囊泡的组成蛋白作为标记，在海马中未观察到突触phimin依的变异。 3）使用[^<35> s]标记的寡核苷酸作为小鼠C-SRC mRNA作为探针，在海马锥体细胞层中没有观察到的变化，因此在原位杂交组织化学中，在海马锥体细胞层中观察到没有变化，并且齿状颗粒细胞层和跨性能的指示在脑部的趋势范围内呈现，并指出了透明的型号，并指出了杂交的临床造型，并具有氢化的能力。内嗅场中的C-SRC蛋白。从上面提出，C-SRC作为海马CAI选择性神经元死亡中的发球侧的调节剂，被认为是后突触的一侧。