マウスc‐kit遺伝子異常と症状との相関性

小鼠c-kit基因异常与症状的相关性

基本信息

批准号：
05770151
负责人：
辻村亨
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

マウスのW遺伝子座はc‐kitセレプター・チロシンキナーゼ(KIT)をコードとしており、この遺伝子座に2個の突然変異を持つ多くのマウスでは貧血がみられメラノサイト・マスト細胞及び生殖細胞が欠損する。本研究では日本で発見された突然変異(W^<Jic>,W^n)とホモになっても生殖力を持つ突然変異(W^f,W^<sh>)のc‐kit遺伝子異常を明らかにし、ミュータントマウスの症状、特に皮膚におけるマスト細胞数との相関性を示した。1.KITはc‐kit蛋白が二量体を形成することにより機能しこの二量体形成には正常に発現したc‐kit蛋白の細胞外領域を必要とする。W^<Jic>/+マウスでは皮膚のマスト細胞数が有意に減少しており"dominant negative"表現型を示した。これはW^<Jic>突然変異がキナーゼドメインのATP結合領域の点突然変異であるため、W^<Jic>/+マウスではキナーゼ活性がないc‐kit蛋白が参画した機能のないKITが作られるからであった。2.W^n/W^nマウスは強い貧血のため生後5日以内に死亡するが、W^n/+マウスでは皮膚のマスト細胞数は減少しなかった。W^n突然変異はキナーゼドメインの点突然変異であったが、そのc‐kit蛋白はサイズが小さく細胞外に発現していないため異常なc‐kit蛋白が参画したKITは作られない。このためW^n/+マウスは症状を示さない"null"表現型をとると考えられた。3.W^f/W^fマウスが雌雄とも生殖能力を有し貧血や皮膚のマスト細胞数の減少が軽度であるのは、W^f突然変異がキナーゼ領域の点突然変異であるにも拘らずキナーゼ活性がかなりの程度保たれるからであった。4.W^<sh>/W^<sh>マウスではマスト細胞とメラノサイトを欠損するが貧血がみられず生殖力もあるのは、W^<sh>突然変異はc‐kit遺伝子の構造領域の突然変異ではなくマスト細胞においてc‐kit遺伝子の発現がみられないからであった。W^<sh>突然変異はマスト細胞とメラノサイトにおいてc‐kit遺伝子の転写を促す制御領域の異常と思われた。

小鼠W基因座编码c-kit受体酪氨酸激酶（KIT），许多在该基因座有两个突变的小鼠表现出贫血并且缺乏黑素细胞、肥大细胞和生殖细胞。在这项研究中，我们研究了在日本发现的 c-kit 基因突变 (W^<Jic>、W^n) 和即使纯合子也能生育的突变 (W^f、W^<sh>)，并显示出突变小鼠的症状之间的相关性，特别是皮肤中肥大细胞的数量。 1.KIT通过c-kit蛋白二聚体的形成发挥作用，而这种二聚体的形成需要c-kit蛋白胞外区的正常表达。在W^<Jic>/+小鼠中，皮肤中肥大细胞的数量显着减少并表现出“显性阴性”表型。这是因为 W^<Jic> 突变是激酶结构域 ATP 结合区的点突变，因此在 W^<Jic>/+ 小鼠中，产生了一个无功能的 KIT，其中 c-kit 蛋白，没有激酶活性，这是因为他被暴露了。 2、W^n/W^n小鼠在出生5天内因严重贫血而死亡，但W^n/+小鼠皮肤中肥大细胞的数量并没有减少。 W^n突变是激酶结构域的点突变，但由于c-kit蛋白较小且不在细胞外表达，因此无法产生异常c-kit蛋白参与的KIT。因此，W^n/+ 小鼠被认为具有“无效”表型，没有表现出任何症状。 3. W^f/W^f 小鼠具有生育能力，并且表现出轻度贫血和皮肤肥大细胞数量减少，尽管 W^f 突变是激酶区域的点突变。因为无论效果如何，激酶活性都在相当程度上得以维持。 4. W^<sh>/W^<sh>小鼠缺乏肥大细胞和黑素细胞，但不表现出贫血并且具有生育能力，因为W^<sh>突变发生在c-kit基因的结构区域。不是由于突变，而是因为在肥大细胞中没有观察到 c-kit 基因的表达。 W^<sh>突变似乎是促进肥大细胞和黑素细胞中c-kit基因转录的调节区域的异常。