活性化KIT遺伝子の導入によるマスト細胞腫高発マウスの作製

通过引入激活的KIT基因产生高肥大细胞肿瘤小鼠

• 批准号: 07272225
• 负责人: 辻村 亨
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07272225/
• 关键词: C-kit遺伝子; 突然変異; 発がん; マスト細胞; トランスジエニックマウス

c-kitレセプター・チロシンキナーゼ(KIT)のAspをValに置換した活性型KIT遺伝子をインターロイキン(IL)-3依存性の培養マスト細胞株(IC-2)に導入すると、導入細胞はIL-3とKITのリガンドであるstem cell factorの両方を含まない培地でも活発に増殖するようになりヌードマウスにおいて造腫瘍性を示した。自律性に増殖する培養マスト細胞腫株(FMA3)ではKITが構成的に二量体を形成するために活性化していた。この原因はjux tamembrane領域の7つのアミノ酸が欠失することに求められた。この新しいタイプの“gain-of-function"突然変異をもつ変異型KIT遺伝子をIC-2細胞に導入すると、導入細胞は自律性に増殖するようになりヌードマウスにおいて腫瘍を形成した。この結果は突然変異によるKITの構成的な活性化がマスト細胞の腫瘍化に深く関与していることを示した。そこでマスト細胞で強く発現するプロテアーゼの1つであるmouse mast cell protease-6(MMCP-6)遺伝子のプロモーターで制御されるヒトの活性型KIT遺伝子(Asp→Val)を導入したトランジェニックマウスを作製した。このトランスジェニックスマウスは突然変異によるKITの構成的な活性化がマスト細胞の腫瘍化に直接的に関与していることを示す良いモデルになると考えられる。

当将c-kit受体酪氨酸激酶(KIT)的Asp替换为Val的活性KIT基因导入白介素(IL)-3依赖性培养肥大细胞系(IC-2)时，导入的细胞变成IL-即使在不含 3 和干细胞因子（KIT 的配体）的培养基中，它也能活跃增殖，并在裸鼠中表现出致瘤性。在自主增殖培养的肥大细胞肿瘤系（FMA3）中，KIT 被组成型激活形成二聚体。其原因被发现是近膜区七个氨基酸的缺失。当携带这种新型“功能获得”突变的突变KIT基因被引入IC-2细胞时，引入的细胞自主增殖并在裸鼠中形成肿瘤。这些结果表明，突变引起的 KIT 组成型激活与肥大细胞肿瘤发生密切相关。因此，我们创建了一种转基因小鼠，其具有受小鼠肥大细胞蛋白酶-6 (MMCP-6) 基因启动子控制的活性人类 KIT 基因 (Asp→Val)，MMCP-6 是肥大细胞中强烈表达的蛋白酶之一。 。这种转基因小鼠被认为是证明突变导致的 KIT 组成型激活直接参与肥大细胞肿瘤发生的良好模型。

项目成果

Hashimoto,K: "Transforming and differentiation-inducing potentials of constitutively activated c-kit mutant genes in the lC-2 murine interlcukin-3-dependent mast cell line" Am J Pathol. 148. 189-200 (1996)

Hashimoto,K：“LC-2 鼠 Interlcukin-3 依赖性肥大细胞系中组成型激活的 c-kit 突变基因的转化和分化诱导潜力”Am J Pathol。

Tsujimura,T: "Constitutive activation of c-kit in FMA3 murine mastocytoma cells caused by deletion of seven amino acids at the juxtamembrane domain" Blood. 87. 273-283 (1996)

Tsujimura,T：“FMA3 鼠肥大细胞瘤细胞中 c-kit 的组成型激活是由近膜域七个氨基酸的缺失引起的”血液。

Morimoto,M: "Pyruvate kinase deficiency of mice associated with nonspherocytic hemolytic ancmia and cure of the ancmia by marrow transplantation without host irradiation" Blood. 86. 4323-4330 (1995)

Morimoto，M：“与非球形细胞溶血性贫血相关的小鼠丙酮酸激酶缺乏症以及通过骨髓移植无需宿主照射来治愈贫血症”血液。

Kanno,H: "Primary structure of murine red cell-type pyruvate kinase(PK)and molccular characterization of PK deficiency identified in the CBA strain" Blood. 86. 3205-3210 (1995)

Kanno,H：“鼠红细胞型丙酮酸激酶 (PK) 的一级结构和 CBA 菌株中鉴定的 PK 缺陷的分子特征”血液。

Kitamura,Y: "Regulation of development, survival and neoplastic growth of mast cells through c-kit receptor" Int Arch Allergy Immunol. 107. 54-56 (1995)

Kitamura，Y：“通过 c-kit 受体调节肥大细胞的发育、存活和肿瘤生长”Int Arch Allergy Immunol。