猫パルボウイルス亜群の分子進化と犬パルボウイルス出現機構に関する研究

猫细小病毒亚群的分子进化及犬细小病毒的出现机制研究

基本信息

项目摘要

本研究は、猫パルボウイルス亜群に属する猫汎白血球減少症ウイルス(FPLV)、ミンク腸炎ウイルス(MEV)、犬パルボウイルス(CPV)の分子遺伝学的な解析を行い、これら3ウイルスの相互関係、ならびにCPV出現機構の解明を目的とした。ウイルスのVPgeneに存在する宿主域決定領域(60-91map units, Horiuchi et al.,J.Gen.Virol.,in press)をPCR法により増幅し、直接塩基配列決定法(Higuchi and Ochman,Nucleic Acide Res.,1989)により塩基配列を決定した。現在までに、FPLV2株(日本;1974,フランス;分離年不明)、CPV4株(日本;1979,1982,1984,1991)、MEV1株(日本,1980)の計7株の塩基配列を決定した。このうち代表的なもの(FPLV1株,CPV3株,MEV1株)についてはDNA Data Base of Japan(DDBJ)に登録した。株数が少なかったため分子系統樹を書くには至らなかったが、塩基配列より予想されるアミノ酸配列の多重アライメントの結果、宿主域決定領域内に系統発生的にCPV特異的と考えられる5個のアミノ酸を同定した[amino acid(aa)93,aa103,aa305,aa564,aa568]。また、Parrishらが米国で報告したaa300,aa305の置換を伴うCPVの変異(Parrish et al.J.Virol.,1991)が日本のCPV分離株でも認められた。猫パルボウイルス亜群の分子進化の全体像を知るためにはより多くのウイルス株の塩基配列を調べる必要があるが、本研究の結果から、系統発生的にCPV特異的なアミノ酸の存在が明かになった。以上の結果はJ.Gen.Virol.(Horiuchi et al., in press)に発表した。また、CPV特異的な5アミノ酸をもつ組み換えMEVを作製し、その生物性状をCPVと比較したが、組み換えMEVはCPVの生物性状を示さず、CPVの出現機構に関してはさらなる研究が必要である。
这项研究进行了属于猫科动物细胞弧病毒亚组的猫核细胞减少病毒(FPLV),MINK肠炎病毒(MEV)和犬小扇形病毒(CPV)的分子遗传分析,旨在澄清这些三个病毒和CPV出现机制之间的相互作用。确定区域(60-91map单元,Horiuchi等人,J。Gen. virol。,在Press中)存在的宿主范围通过PCR扩增了病毒VPGENE中,并且通过直接测序(Higuchi and Ochman,Nucleic Acide Res。,1989)确定了碱基序列。迄今为止,包括FPLV2菌株在内的七个菌株的基本序列(日本; 1974年,法国;隔离年未知年),CPV4菌株(日本; 1979年; 1979,1982,1984,1984,1991)和MEV1菌株(日本,1980年)。这些(FPLV1菌株,CPV3菌株,MEV1菌株)的代表在日本的DNA数据库(DDBJ)注册。尽管菌株的数量很少,但我们无法编写一棵分子系统发育树,这是由于从碱基序列预测的氨基酸序列的多个比对的结果,在确定宿主范围内确定了五个被认为是系统发育的氨基酸[氨基酸(aa)93,aa103,aa103,aa103,aa305,aa564,aa aa nike cpv特异性。另外,Parrish等人报道的CPV中的AA300取代的突变。 (Parrish等人J. Virol。,1991)在日本CPV分离株中也观察到了美国。为了全面了解猫细胞小叶小组的分子进化,有必要研究更多病毒菌株的碱基序列,但是这项研究的结果揭示了系统发育上CPV特异性氨基酸的存在。上述结果发表在J.Gen.Virol中。 (Horiuchi等人,印刷中)。此外,尽管产生了具有CPV特异性五种氨基酸的重组MEV,并将其生物学特性与CPV进行了比较,但重组MEV并未表现出CPV的生物学特性,并且需要对CPV外观机理进行进一步的研究。

项目成果

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M.Horiuchi: "Mapping of determinants of the host range for canine cells in the genome of canine parvovirus using canine parvovirus/mink enteritis virus chimeric viruses" Jouranal of General Virology. (In press).
M.Horiuchi:“使用犬细小病毒/水貂肠炎病毒嵌合病毒绘制犬细小病毒基因组中犬细胞宿主范围的决定因素”《普通病毒学杂志》。
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