微小管安定性制御の情報伝達と細胞癌化

微管稳定性控制与细胞癌发生的信息传递

基本信息

批准号：
15024216
负责人：
三木裕明
金额：
$ 3.07万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15024216/
关键词：
Wnt Dishevelled 微小管 β-catenin

项目摘要

WntシグナルはDishevelledという細胞内情報伝達因子を介して伝えられる。Dishevelledの下流において、遺伝子発現を制御するβ-cateninの安定化など様々な細胞応答が起こる。私はDishevelledの強制発現が神経芽細胞腫N1E-115細胞からの顕著な神経突起形成を誘導することを見付け、しかもそれが微小管の安定化に起因することを示唆する実験データを得た。この分子メカニズムを解明するため、まずDishevelledの様々な部分発現コンストラクトを作製して、それぞれの神経突起誘導・微小管安定化能や、その他β-cateninの安定化能などを調べた。その結果、微小管の安定化作用は従来からよく解析されてきたβ-catenin安定化やその他の既知のWntシグナル系とは全く独立しているものであることが分かった。この作用にはDishevelledのDIXドメイン以降からPDZドメインの途中までの部分で十分であり、現在その部分に結合する蛋白の網羅的解析を行っている。一方、Dishevelledと相互作用することが既に報告されている蛋白の中で微小管安定化に関わっているものがあるかどうか探索したところ、細胞と基質間の接着に関わるインテグリンに結合することで発見・命名されたIntegrin-linked kinase(ILK)が候補として挙がってきた。実際ILKを培養細胞に強制発現させるとそれだけで微小管安定化を誘導できた。しかもDishevelledの微小管安定化誘導ドメインとして同定した部分と細胞内で複合体を作ることも分かった。現在ILKがDishevelledによる微小管安定化に関わる有力候補の一つと考え、そのより詳細な機能解析を継続している

Wnt信号通过称为Disheveled的细胞内信号传导因子传输。变使人的下游发生了各种细胞反应，包括调节基因表达的β-catenin的稳定。我发现强迫表达的衣衫evleveveveveveveveveveve乱会诱导神经母细胞瘤N1E-115细胞的显着神经突，并获得了实验数据，这表明这是由于微管稳定而引起的。为了阐明这种分子机制，首先生产了各种侧表构建体，以研究每种神经突诱导和微管稳定的能力，以及其他稳定的β-catenin。结果，发现微管的稳定效应完全独立于β-catenin稳定性和其他已经进行了很好分析的已知Wnt信号系统。从DIX结构域开始到DINDEVEVEVEL的PDZ域中的部分足以实现这种效果，并且我们目前正在对与该区域结合的蛋白质进行全面分析。另一方面，当我们搜索已经报告的任何已经报告的蛋白质是否参与了微管稳定化时，我们发现整联蛋白连接的激酶（ILK）（ILK）通过与细胞和底物之间的粘附和底物之间的结合蛋白结合而被发现并命名为候选者。实际上，仅在培养的细胞中伊尔克的强迫表达可以诱导微管稳定。此外，发现在细胞内形成复合物，其部分被识别为稳定稳定的诱导域。目前，ILK被认为是通过Disheveled参与微管稳定的主要候选者之一，并继续进行更详细的功能分析。