多発性骨髄腫に特異的に見られる染色体転座の分子生物学から生化学への展開

在多发性骨髓瘤中特别观察到的染色体易位从分子生物学到生物化学的发展

基本信息

批准号：
15023218
负责人：
片岡浩介
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Nara Institute of Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15023218/
关键词：
多発性骨髄腫染色体転座転写制御 Maf interleukin6

项目摘要

近年、多発性骨髄腫の発症に関わると考えられる染色体転座(c-maf,mafB,cyclinD,FGF-receptor 3など)が次々と同定されつつある。しかしながら、その他の種類の血液腫瘍と比べて多発性骨髄腫においては、転座が起こった結果、どのような細胞内の変化がもたらされるのかについての知見がほとんどないのが現状である。本研究では、特に高い頻度で染色体転座が見い出されるc-maf遺伝子産物に的を絞って解析を行った。c-MafはAP-1(Fos/Jun)系のbasic-leucine zipper型転写活性化因子に属するが、そのDNA結合の特異性、細胞外刺激に対する応答など、独特の性質を数多く持っていることをこれまでにあきらかにしてきた。そこで多発性骨髄腫におけるMafの標的遺伝子を検索したところ、interleukin-6遺伝子promoter上にMafの結合配列MAREを見いだした。また、luciferase assayを用いて、interleukin-6 promoterがMARE依存的にMafにより強く活性化されることをあきらかにした。interleukin-6はMafの直接の標的遺伝子であり、多発性骨髄腫のautocrine増殖因子として働いている可能性が示唆された。実際にc-maf locusに転座を持つ多発性骨髄腫細胞株において、c-Mafタンパク質が過剰に発現していることは確認できたが、多発性骨髄腫細胞株は培養が比較的困難で、生化学的な解析を行うために安定した状態で大量に供給することが難しいことも判明した。これを克服するため、膵臓由来のインスリン産生腫瘍細胞株やグルカゴン産生腫瘍細胞株がMafタンパク質を比較的高いレベルで発現していることがわかったので、今後は、これらをモデル系として用い、得られた結果を逐次、多発性骨髄腫細胞株へフィードバックして確認してゆくという方策をとる計画である。

近年来，认为涉及多发性骨髓瘤发展的染色体易位（例如C-MAF，MAFB，Cyclind，FGF受体3）。但是，与其他类型的血液学肿瘤相比，目前对易位导致细胞内变化的类型的了解很少。在这项研究中，我们专注于C-MAF基因产物，其中发现染色体易位的频率特别高。尽管C-MAF属于AP-1（FOS/JUN）系统的基本亮氨酸拉链类型转录激活剂，但迄今为止已揭示其具有许多独特的特性，例如其DNA结合特异性和对细胞外刺激的响应。因此，当我们在多发性骨髓瘤中搜索MAF的靶基因时，我们发现MAF在白介素-6启动子上的结合序列母马。此外，使用荧光素酶测定法，揭示了白介素6启动子以母马的依赖性方式强烈激活。有人提出，白介素-6是MAF的直接靶基因，可以作为多发性骨髓瘤的自分泌生长因子。尽管已经证实C-MAF蛋白实际上是在已转移到C-MAF基因座的多个骨髓瘤细胞系中表达的，但还发现多种骨髓瘤细胞系相对较难培养，并且很难以稳定的状态大量提供生物化学分析。为了克服这一点，已经发现胰腺来源的产生胰岛素的肿瘤细胞系和产生胰高血糖素的肿瘤细胞系表达了相对较高的MAF蛋白，并且将来，我们计划将其用作模型系统，并采取措施以依次将结果送回多个骨髓瘤细胞系的结果。