HIV-1Vprと相互作用する細胞内因子を介して制御されるウイルス増殖機構の解明

阐明通过与 HIV-1Vpr 相互作用的细胞内因子调节的病毒增殖机制

基本信息

批准号：
15019115
负责人：
間陽子
金额：
$ 3.33万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

VprはHIV粒子に取り込まれるアクセサリー遺伝子産物であり、HIV-1 Pre-integration complex(PIC)のマクロファージにおける核移行に重要である。これまで我々は、Vprがimportinαを介して核移行することを明らかにしてきた。本研究では、Vprの核移行が複数あるimportinαのisoformの内、主要な3つのisoform(Rch1Qip1,NPI-1)により促進される事を明らかにした。いずれのisoformもヒト末梢血単球および静止期CD4^+T細胞より、最終分化マクロファージおよび活性化CD4^+T細胞において高い発現が認められた。これらの細胞質画分を用いて核移行解析を行った結果、末梢血単球および静止期CD4^+T細胞では、Vprは核膜に局在したままであったが、最終分化マクロファージおよび活性化CD4^+T細胞で核移行を示したことから、この核移行の促進効果は、Rch1の発現量と比例している可能性が示唆された。一方、importinαとの結合能を失ったVpr変異体は核移行を示さなかった。さらに、最終分化マクロファージにVprをマイクロインジェクションすると核移行を示したが、変異体では消失した。同様に、このVpr変異体を有するHIV-1のマクロファージおよび活性化CD4^+T細胞への感染性が著しく減弱した。以上の結果から、生体内のHIV-1標的細胞におけるHIV-1感染において、Vprの核移行能の重要性が示された。

VPR是一种辅助基因产物，已掺入HIV颗粒中，对于HIV-1巨噬细胞中HIV-1前整合复合物（PIC）的核转运很重要。到目前为止，我们已经证明VPR是通过importinα易位的。这项研究表明，VPR的核转运是由ImportINα的多种同工型的三种主要同工型（RCH1QIP1，NPI-1）促进的。在末端分化的巨噬细胞和活化的CD4^+T细胞中，这两种同工型都比人外周血单核细胞和固定的CD4^+T细胞高。使用这些细胞质分数进行了核转运分析，尽管VPR仍位于外周血单核细胞和固定的CD4^+T细胞中的核膜，但建议核转运的作用可能与RCH1表达水平成比例。另一方面，失去与Importinα结合能力的VPR突变体没有核易位。此外，将VPR的显微注射到末端分化的巨噬细胞中显示出核易位，但在突变体中消失了。同样，将这种VPR突变体携带到巨噬细胞和活化的CD4^+T细胞的感染性显着降低。以上结果表明，VPR在HIV-1感染中在体内HIV-1靶细胞中的核转运能力的重要性。