神経発生における細胞極性制御と中間径繊維骨格、非対称分裂の関連

细胞极性控制、中间纤维骨架与神经发生中不对称分裂的关系

基本信息

批准号：
15016010
负责人：
若松義雄
金额：
$ 3.46万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究に関してはこれまでに1.中間径フィラメントタンパク質であるTransitinがNumbと同様に分裂期神経幹細胞の細胞表層の基底膜側に局在すること2.TransitinがNumbに直接結合すること、3.Transitinの機能がNumbの非対称な細胞内局在に必要であること、4.Transitinが細胞分裂の終わりに基底膜側から側方に細胞表層を移動して不等分配されること等を明らかにしてきた。今年度はまず、Transitin-EGFPを導入した脳組織を脳室側からタイムラプス観察して、脳全体を一つのフィールドとして考えた時にTransitinの側方移動が何らかの方向性を示すのか調べた。その結果、Transitinが不等分配される場合には法則性は認められなかったが、等分配される場合にはTransitinがmedial-caudal側に局在する傾向が認められ、ある種の平面内極性の存在が示唆された。また、Transitinの側方移動のメカニズムを探る目的で微小管骨格やアクチンフィラメントに注目して解析を行った。その結果、分裂中の神経上皮細胞をサイトカラシンDで処理した場合、分裂中の神経幹細胞の表層に分布するアクチン骨格が断片化し、その結果Transitinが細胞表層から外れてしまうことがわかった。すなわち、Transitin/Numb複合体はアクチン骨格を介して細胞膜に結合していると考えられた。また、非筋肉ミオシン阻害剤であるBlebbistatinで処理するとTransitinが側方に移動できなくなった。細胞表層にはMyosin2が多く分布しており、Transitin/Numb複合体はMyosin2によって表層アクチン上を運ばれていると考えられた。

在这项研究中，我们先前已经揭示了1. trantitin，一种中间细丝蛋白，位于有丝分裂神经干细胞的细胞表面的地下膜一侧，例如numb，2。直接与numb结合，3。转过蛋白，是与NumB的不对称的孔侧面的不对称的侧面分配的，以及4。分配。今年，我们首先观察到从心室中引入的带状EGFP的脑组织的延时，以确定转运蛋白的横向运动是否指示整个大脑被视为单个场时的任何方向。结果，当转运蛋白分配不平等时未观察到规律性，但是当转运素平均分配时，传输的趋势倾向于将转运素定位在内侧审计侧，这表明存在一定的平面极性。此外，我们进行了针对微管骨骼和肌动蛋白丝的分析，以探索过渡性侧向运动的机理。结果，当将神经上皮细胞用细胞切拉斯蛋白D处理时，分布在分裂神经干细胞表面层中的肌动蛋白骨架就会碎裂，从而导致转运蛋白从细胞的表面层移动。也就是说，通过肌动蛋白骨骼，人们认为转运蛋白/麻木复合物与细胞膜结合。此外，当用非肌肉肌球蛋白抑制剂Blebbistatin处理Blebbistatin时，转运蛋白无法横向移动。肌动蛋白2分布在细胞表面，被认为是肌动蛋白2在表面肌动蛋白上携带的转染蛋白/麻木复合物。