免疫担当細胞の自然がん監視能を活用した新規ドラッグデリバリーシステムの開発

开发利用免疫活性细胞天然癌症监测能力的新型药物递送系统

基本信息

批准号：
20015025
负责人：
田畑泰彦
金额：
$ 5.25万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は、「遺伝子治療法」と「免疫・細胞療法」とを融合した新しいがん治療DDS技術を創製し、その治療効果について検証することである。すなわち、がんへ直接働くあるいは他の細胞に働いて免疫・細胞療法活性を高める作用をもつタンパク質をコードしたプラスミドDNAを免疫担当細胞へ導入することによって、免疫担当細胞を遺伝子改変する。次に、その遺伝子改変免疫担当細胞をがん治療に用いる。このことにより、上述した「遺伝子治療法」および「免疫・細胞療法」で問題となっていた、プラスミドDNAの体内動態制御および免疫担当細胞の活性増強の両方を解消することが可能であり、がん治療の効果増強が期待される。本年度は、前年度の結果をもとに細胞をマクロファージから樹状細胞(DC)に変えて、細胞への導入プラスミドDNAとしては抗がんサイトカインであるインターロイキン(IL)12をコードするプラスミドDNAを用いた。異なる多糖と異なるカチオン化試薬を用いて様々なカチオン化多糖を作製し、DCへのプラスミドDNA導入作用について調べた結果、スペルミン導入デキストランが優れていることがわかった。そこで、このベクターを用いてIL12プラスミドDNAをDCへ導入した。プラスミド導入DCは2週間にわたってIL12タンパク質を分泌した。得られたIL12プラスミドDNA導入DCを担がんマウスの尾静脈より投与した。その結果、DCのみの投与に比較して、高い抗がん活性が認められた。プラスミド導入DCを投与したマウス肝臓よりリンパ球を採取して、リンパ球とがん細胞とを混合して培養したところ、がん細胞が死滅した。この結果は、DCにより体内のがん免疫応答が高まったことを示している。

这项研究的目的是创建一种新的癌症治疗DDS技术，该技术将基因疗法与免疫和细胞疗法结合在一起，并验证其治疗作用。换句话说，通过引入编码直接作用于癌症的蛋白质或在免疫细胞中增强免疫/细胞治疗活性的作用，可以通过遗传修饰免疫细胞来改变。然后将转基因的免疫细胞用于癌症治疗。这可以解决质粒DNA的体内动力学和免疫反应细胞活性的增强，这是上述“基因疗法”和“免疫/细胞疗法”的问题，并有望增强癌症治疗的有效性。今年，根据上一年的结果，将细胞从巨噬细胞转化为树突状细胞（DCS），并将编码白介素（IL）12的质粒DNA（一种抗癌细胞因子）用作质粒DNA引入细胞中。使用不同的多糖和不同的阳离子试剂制备了各种阳离子多糖，并研究了将质粒DNA引入DCS的效果，并发现精子引入的葡萄糖是优越的。因此，使用此载体将IL12质粒DNA引入DC中。质粒引入的DC将IL12蛋白分泌2周。通过癌小鼠的尾静脉施用所得的IL12质粒DNA引入的DC。结果，与单独的直流给药相比，观察到较高的抗癌活性。从小鼠的肝脏中收集淋巴细胞，给予质粒引入的DC，并将淋巴细胞和癌细胞混合并培养，并杀死癌细胞。该结果表明DC增强了人体的癌症免疫反应。