普遍的幹細胞制御機構と腫瘍細胞分化

通用干细胞控制机制与肿瘤细胞分化

基本信息

批准号：
20013016
负责人：
平尾敦
金额：
$ 9.09万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20013016/
关键词：
がん分化奇形腫

项目摘要

本研究では、我々が独自に開発した幹細胞分離/標識(ヌクレオステミン-GFP)システムにより、がん組織中の源となる細胞いわゆる"Tumor-initiating cell"がいかに腫瘍細胞を供給し、どのようなシグナルによって制御を受けているかを明らかにすることを目的とした。平成20年度までに作製したヌクレオステミン-GFPトランスジェニックマウス由来の脳腫瘍を作製し解析した。GFPの輝度によって細胞分画し、GFP陽性細胞が、試験管内での高い増殖能を持つこと、またこの細胞が生体内で脳腫瘍産生能をもっ細胞(Tumor-initiating cell)であることを認めた。さらにGFP陽性細胞と陰性細胞集団の遺伝子発現解析を行った。その結果、GFP陽性細胞で受容体型チロシンキナーゼc-Metの発現が有意に高いことを認めた。また、免疫組織化学法により、c-Met受容体がこれらの細胞でリン酸化していることも判明した。リガンドであるHGFの作用により、GFP陽性脳腫瘍細胞が活発にマトリゲル内に遊走することを観察した。このことから、脳腫瘍におけるTumor-initiating cellは、HGF/c-Metシグナルによって、その生存や浸潤が制御されていると考えられた。このシステムを用いることによって、脳腫瘍の未分化細胞の位置情報、特に血管構造やストローマ細胞などの微小環境からの制御機構、特に腫瘍細胞分化に関わる制御機構の解明が期待された。

在本研究中，我们利用自主研发的干细胞分离/标记（nucleostemin-GFP）系统来研究癌组织中所谓的“肿瘤起始细胞”如何供给肿瘤细胞，以及它们如何与肿瘤细胞相互作用。这项研究的目的是澄清它是否受信号控制。创建并分析了 2008 年之前生产的 nucleostemin-GFP 转基因小鼠的脑肿瘤。根据GFP亮度对细胞进行分级，发现GFP阳性细胞在体外具有较高的增殖能力，在体内则被发现是肿瘤起始细胞。此外，还对 GFP 阳性和阴性细胞群进行了基因表达分析。结果，我们发现受体酪氨酸激酶c-Met的表达在GFP阳性细胞中显着升高。免疫组织化学还显示这些细胞中的 c-Met 受体被磷酸化。我们观察到，由于配体 HGF 的作用，GFP 阳性脑肿瘤细胞主动迁移到 Matrigel 中。这表明脑肿瘤中肿瘤起始细胞的存活和侵袭是由 HGF/c-Met 信号控制的。通过该系统，我们期望阐明脑肿瘤中未分化细胞的位置信息，特别是血管结构和基质细胞等微环境的控制机制，特别是与肿瘤细胞分化相关的控制机制。