プリンヌクレオチドの酸化と脱アミノ化に起因する突然変異と発がん

嘌呤核苷酸氧化、脱氨引起的突变和致癌

基本信息

批准号：
20012038
负责人：
作見邦彦
金额：
$ 7.55万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20012038/
关键词：
ITPase イノシン突然変異ヌクレオチド ATP ヌクレオチドプール発がん

项目摘要

酸化と脱アミノ化は核酸,特にプリンヌクレオチドの生体内における化学修飾の代表的なものである。これらの修飾ヌクレオチドは元のヌクレオチドとは異なる塩基と対合する性質を有しており,突然変異ひいては発がんの原因となると考えられる。我々は,脱アミノ化プリンヌクレオチドが生体に及ぼす影響を解析するために脱アミノ化プリンヌクレオシド3リン酸を分解する酵素,ITPaseをコードする遺伝子のノックアウトマウス(Itpa遺伝子欠損マウス)を作製,解析を行った。Itpa遺伝子ホモ欠損マウスは成長遅延を呈し,生後14日前後で死亡した。その心臓は心筋症様の特徴を呈していた。生化学的解析より赤血球にITPの蓄積が,また複数臓器のRNAにイノシンヌクレオチドの蓄積が確認された。これらのことは,脱アミノ化プリンヌクレオチド(ITPなど)が細胞内で確かに産生していること,ITPaseはこれらの修飾ヌクレオチドを分解する役割を担っていることを示している。Itpa遺伝子ホモ欠損マウスはC57BL/6J genetic backgroundでは出生前に死亡する。このItpa遺伝子ホモ欠損胎仔の細胞のRNAには野生型胎仔の細胞のRNAに含まれる量に比べて50倍以上の量のイノシンが,またDNAには野生型胎仔の細胞のDNAと比べて約8倍の量のデオキシイノシンが蓄積していた。これらの胎仔から調整した初代Itpa遺伝子欠損MEFsは,野生型初代MEFsに比べて,倍加時間の遷延,染色体異常と一本鎖DNA切断の増加という表現型を示した。これらの結果を研究論文としてNucleic acids researchとCell death and differentiationに発表した。

氧化和去除氨基是核酸，尤其是夹杂哑光的化学修饰的典型代表。这些修饰的核苷酸具有与原始核苷酸不同的碱匹配的特性，并被认为引起突变并引起癌症。我们创建并分析了基因基因敲除小鼠（ITPA基因缺陷小鼠），这是一种将活体上灭绝的prinnunculeotide分解为生物的酶，这是一种分解3磷酸的酶。 ITPA基因同型小鼠出生后14天左右死亡。心脏的特征是心肌病。从生化分析中证实了ITP在红细胞中的积累，并且已经证实了肌苷Nurotide在多个器官RNA中的积累。这些表明这些灭绝的丙烯酰胺（ITP等）肯定会在细胞中产生，并且ITPase负责拆卸这些修饰的核苷酸。 ITPA基因同性恋缺乏小鼠在C57BL/6J遗传背景中出生前死亡。该ITPA基因homotric细胞RNA的肌球蛋白比野生胎儿细胞的RNA的含量高出约50倍，而DNA与野生胎儿细胞的DNA相比大约是Deosquisinosine的DNA。 MEF是根据这些胎儿调整的第一个ITPA基因缺陷的MEF，与野生型MEF相比，单链DNA切割的表达，染色体异常和单个链式DNA切割的增加。这些结果发表在核酸研究和细胞死亡以及作为研究论文中的分化中。