セントロメア新生機構の分子解剖
着丝粒发生机制的分子解剖
基本信息
- 批准号:18058022
- 负责人:
- 金额:$ 2.82万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:2006
- 资助国家:日本
- 起止时间:2006 至 2007
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
人為的操作で致死的なセントロメア傷害を誘発した分裂酵母細胞集団よりネオセントロメア獲得細胞を遺伝的に選択できるシステムを構築し、セントロメア新生現象の分子レベルでの機構解明を試みた。昨年度までに、第一染色体セントロメアの欠失で致死的な細胞群から復帰生存株を複数単離し、セントロメア切除以外には染色体DNA構造に変化がみとめられなかったネオセントロメア形成株におけるセントロメア特異的ヒストンバリアントCENP-Aの染色体結合部位を決定した。本年度はさらに代表的なネオセントロメアにおけるMis6、Mis12、CENP-Cなど染色体分布をDNAマイクロアレーと特異的PCRによって解析し、それらは連続的に転写抑制が起こっている遺伝子クラスター領域に共通して分布していることを明らかにした。そのような遺伝子クラスターは、窒素源枯渇によって転写が誘導される性質を共通して示すが、ネオセントロメア形成株ではそのような窒素源枯渇に応じた転写誘導が不能なことも判明した。また、ネオセントロメア株におけるSwi6/HP1やヒストンH3のK9メチル化の分布も解析し、それらがテロメア近傍においてCENP-Aなどの結合領域に隣接していることを明らかにした。また、人為的なセントロメア傷害をヘテロクロマチン形成に欠損を示すswi6、clr4、dcr1等の変異株で誘導すると、ネオセントロメア形成細胞の出現が相対的に低下し、テロメア融合による復帰生存株の出現頻度が増加することが判明した。ヘテロクロマチンはセントロメア傷害に際した染色体応答の調節に関与していると考えられる。
我们构建了一个系统,从人工诱导致死性着丝粒损伤的裂殖酵母细胞群中遗传选择新着丝粒获得细胞,并试图在分子水平上阐明着丝粒形成的机制。直到去年,我们从一个因1号染色体着丝粒缺失而致死的细胞群中分离出了多个回复突变的幸存者,以及新着丝粒形成菌株中的着丝粒特异性组蛋白,其中除了着丝粒之外,没有观察到染色体DNA结构的变化。确定了变体CENP-A的染色体结合位点。今年,我们利用DNA微阵列和特异性PCR进一步分析了Mis6、Mis12和CENP-C等染色体在典型新着丝粒中的分布,发现它们普遍分布在转录抑制持续发生的基因簇区域。很明显我正在这样做。此类基因簇通常表现出通过氮源耗尽诱导转录的特性,但也发现新着丝粒形成菌株不能响应氮源耗尽而诱导转录。我们还分析了新着丝粒菌株中Swi6/HP1和组蛋白H3的K9甲基化分布,发现它们与端粒附近的结合区域(例如CENP-A)相邻。此外,当在异染色质形成缺陷的突变株(如swi6、clr4和dcr1)中诱导人工着丝粒损伤时,新着丝粒形成细胞的出现相对减少,并且由于端粒融合而导致的回复幸存者的频率减少发现增加。异染色质被认为参与着丝粒损伤时染色体反应的调节。
项目成果
期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Neocentromere formation in fission yeast
裂殖酵母中新着丝粒的形成
- DOI:
- 发表时间:2007
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Fukata;Y. et al.;石井浩二郎
- 通讯作者:石井浩二郎
Neocentromere formation and telomere fusion:Two modes of survivors from centromere disruption
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- DOI:
- 发表时间:2007
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Minoshima;Y.;Kohta Takahashi
- 通讯作者:Kohta Takahashi
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- DOI:
- 发表时间:2007
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Ishii;K.
- 通讯作者:K.
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