クロマチン構造変換の及ぼす調節領域を局限化する機構

定位受染色质结构变化影响的调节区域的机制

基本信息

批准号：
17054040
负责人：
石井浩二郎
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Kurume University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ヘテロクロマチンは遺伝子転写を抑制する閉じたクロマチン構造であり、特異的なヒストン修飾やその修飾特異的に結合する凝集蛋白質が分子基盤を担う。分裂酵母でもそれらの要素は高度に保存されており、染色体動態を制御するセントロメアDNA領域においては、Mis6キネトコア複合体の相互作用するヌクレアーゼ高感受性の特殊クロマチン構造領域の両端にひろがって形成されている。それらの領域のDNAは特徴的な反復配列で構成されているが、ヘテロクロマチン構造領域とキネトコアの特殊クロマチン構造領域の間の境界を決定する分子要因について解析を試みた。クロマチン免疫沈降などに基づく生化学的手法と遺伝子変異体を用いた遺伝学的手法による解析の結果、それらの領域画定は双方のクロマチン構造に共に依存した拮抗的なかたちで達成されていることが判明した。通常の生体内では常にほぼ同一のDNA配列上に中央ドメインの周辺ヘテロクロマチンの境界は形成されるが、境界自体はDNA一次配列に規定された絶対的で構造的な隔壁ではないという結論が得られた。また、セントロメアのヘテロクロマチン領域からはRNAi経路を通じてsiRNAが産出されているが、分裂酵母でのヘテロクロマチン領域の異所的な形成には、そのsiRNAの配列に対応するDNA配列が機能することを見出した。ヘテロクロマチン領域形成を確立するサイレンサーDNA配列配列についての無作為なスクリーンと任意の配列の試行の双方によって、siRNA相当配列にヘテロクロマチン形成誘導能があることを確認した。また、そのようなDNA配列から産出して周辺に拡がるヘテロクロマチン構造を遮断する因子の解析を行った結果、セントロメアDNA領域での観察とは異なり、分裂酵母染色体には絶対的で構造的な隔壁の機能を有する機構が存在することを確認した。

异染色质是一种封闭的染色质结构，可抑制遗传转移，并且特异性的病变修饰和具有特异性结合的粘粘蛋白是分子碱基的。这些元素被高度保存在酵母中，在控制染色体的Centromere DNA区域中，它是通过以高灵敏度（一种特殊的染色质结构区域）扩散MIS6动力学复合物的两端来形成的。这些区域中的DNA由特征重复的序列组成，但是我们试图分析确定杂细胞结构区域和动力学特殊染色质结构区域之间边界的分子因子。由于生化方法的分析基于染色质免疫沉积和遗传方法，这些区域绘画以依赖两种染色质结构的拮抗形式实现。在正常的生活体中，中央结构域的异染色质的边界总是在同一DNA序列上形成，但是可以得出结论，边界本身不是DNA主要序列中规定的绝对和结构伴侣。 siRNA是通过Centromere的异染色质区域的RNAi途径产生的，但是具有部门酵母的异染色质区域的多功能形成是与sirna序列相对应的DNA序列。建立异染色质区域形成的消音器DNA序列中的随机筛选和任何序列试验已经证实，siRNA形状的序列具有杂羟蛋白质素的形成诱导。此外，由于分析因子阻断了从这种DNA阵列产生的异染色质结构并在周围传播的因素，与Centromere DNA区域的观察不同，绝对和结构盆地是分裂酵母染色体的绝对和结构伴侣。已经确认有一种具有功能的机制。