転写制御と細胞分裂制御におけるクロマチン構造関連分子と分裂制御因子のクロストーク

转录调控和细胞分裂调控中染色质结构相关分子与分裂调节因子之间的串扰

• 批准号: 07J05310
• 负责人: 蓑島 幸範
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J05310/
• 关键词: セントロメア; CENP-50; CENP-A; Plk1; Aurora; 細胞分裂; 染色体分; リン酸化

これまでに、細胞分裂制御分子であるMgcRacGAPと相互作用する分子としてCENP-50を同定し、それが恒常的セントロメアタンパク質であり,染色体分配に機能を有することを見出していた。また、CENP-50のセントロメア局在はCENP-Hに依存することも見出しており、本研究において、以下の点を明らかとした。1.CENP-50のC末がセントロメア局在に必要である。2.CENP-50のC末はCENP-Hと直接結合するが、この直接の相互作用のみではCENP-50のセントロメア局在を説明できない。3.CENP-50のN末の過剰発現は細胞分裂期の前中期停止を引き起こす。4.この前中期停止はCENP-50のN末によるPlk1の脱局在により引き起こされる。以上のことから、CENP-50はN末でPlk1と結合し、C末を介してセントロメアへ局在することで、Plk1をセントロメア領域に運ぶ機能を持つことが推察された。これらの結果は、現在投稿中である。また、恒常的セントロメア局在分子であるCENP-Aは7番目のセリンがAuroraAおよびBによりリン酸化されることが知られている。このリン酸化は、染色体分配に機能を有すると考えられている。この機構をさらに解析するため、7番目のセリンにリン酸基を付加したペプチドを用いて、このリン酸化を認識し結合するタンパク質の同定を試みた結果、数種のタンパク質が候補として得られた。

到目前为止，我们已经鉴定出CENP-50是一种与细胞分裂控制分子MgcRacGAP相互作用的分子，并发现它是一种组成型着丝粒蛋白，具有染色体分离的功能。我们还发现CENP-50的着丝粒定位依赖于CENP-H，在本研究中我们澄清了以下几点。 1.CENP-50的C末端是着丝粒定位所必需的。 2.CENP-50的C末端直接与CENP-H结合，但仅这种直接相互作用并不能解释CENP-50的着丝粒定位。 3.CENP-50 N 末端的过度表达导致细胞分裂过程中中期停滞。 4. 这种前期停滞是由 CENP-50 N 末端 Plk1 离域引起的。由此推断，CENP-50具有通过N末端与Plk1结合并通过C末端定位于着丝粒而将Plk1转运至着丝粒区域的功能。目前这些结果正在提交中。此外，已知CENP-A的第七个丝氨酸是组成型定位的着丝粒分子，被AuroraA和AuroraB磷酸化。这种磷酸化被认为在染色体分离中具有功能。为了进一步分析这一机制，我们尝试使用第七个丝氨酸上添加了磷酸基团的肽来鉴定识别并结合这种磷酸化的蛋白质，结果获得了几种蛋白质作为候选。